[发明专利]低温冷冻干燥法行生物支架材料基质再填充

说明书

技术领域    医学，组织工程学。 

背景技术    正常血管壁由内膜、中膜、外膜构成，其间中膜的胶原纤维及弹力纤维构成了血管壁的支架成分。在构建组织工程血管的研究中，人们发现同种异体或异种血管中免疫原性最强的是细胞及基质成分，因此在去除血管壁的细胞及基质成分后如何保持管壁的生物力学强度成为了当前的研究热题。为解决此类问题，我们设想对脱细胞脱基质管壁支架进行冷冻干燥处理，该方法在去除支架水分的同时还可增加支架的孔隙率，再经低免疫原性的类基质成分(如明胶、壳聚糖、小肠粘膜下基质等)对该血管支架进行基质再填充。实验证实经基质重建的脱细胞管壁既可降低免疫原性，又可恢复脱细胞管壁的生物力学强度。 

发明内容    血管经脱细胞、脱基质处理后构建成血管壁支架，经冷冻干燥处理后，在去掉其水分同时增加了支架的孔隙率，通过应用类基质成分对该血管支架进行基质再填充。该基质重建方法为构建组织工程血管提供了新的构建思路及启发。 

附图说明    图1：脱细胞脱基质血管壁冷冻干燥示意图； 

具体实施方式  异种血管在经脱细胞及脱基质处理后，构建的低免疫原性的血管壁，我们将其称为“血管壁支架”，在经冷冻干燥处理后，应用类基质成分对该血管壁支架进行基质再填充(见图1)。构建方法：应用酶+去垢剂的方法去除血管的细胞及基质成分，经充分漂洗后构建纯净的血管壁支架，在无菌条件下利用程控降温仪，以2℃·min^-1的降温速率对标本进行预冻，将标本预冻到-70℃，程控降温结束后将标本放入冻干机中进行干燥12小时，干燥后将标本放入已配好的类基质溶液中进行复水+基质再填充处理48小时。基质重建后，标本置于碳化二亚胺交联溶液中进行交联处理。基质重建后组织工程血管的优点：因其取材自生物材料，且已最大限度去除了异种的免疫原性，因而其具备低免疫原性、良好的组织亲和性、抗血栓性，且具备良好的管壁弹性。基质重建后组织工程血管的应用：当前临床中应用的聚四氟乙烯人造血管，因其为化学材料构建的血管，管壁薄、弹性差、易形成血栓，与自身血管吻合后易渗血，从而导致外科止血困难，该类组织工程血管因其良好的组织相容性可有望替代聚四氟乙烯人造血管，做为心胸血管外科领域中血管置换手术的的植入材料。