[发明专利]食品中d-α-生育酚和l-α-生育酚气相色谱检测法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测方法，尤其是食品中气相色谱测定d-α-生育酚和l-α-生育酚的检测方法。

背景技术

对大多数维生素来说，天然维生素与合成维生素除在来源上不同之外，它们的化学结构、生物活性及人体的吸收利用上并无很大差别，但维生素E是个例外。维生素E，又名生育酚，其化学结构为色满(Chroman)的衍生物。维生素E有α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ生育三烯酚8种不同异构体，只有α-生育酚以天然和合成形式工业化生产，其它三种生育酚β-、γ-、δ-仅有天然的形式，四种生育三烯酚(α-、β-、γ-、δ-)也是如此，没有合成的生育三烯酚。

天然的和合成的不但在来源上有差异，而且分子结构上有差异，生物活性有差异，在体内的吸收也有差异，从母体传输到子宫胎儿的途径也有重要差异。（1）来源差异：合成的由石油化工产品丙酮、乙烯、间甲酚等经一系列反应生成三甲基氢醌和异植物醇，两者再经化学反应缩合而成合成；天然的广泛存在于各种植物油料的种子中，特别是大豆、玉米胚芽、棉籽、菜籽、葵花籽、米胚芽中。（2）立体结构差异：根据侧链结构的不同，天然的所含的d-α-生育酚（天然形式：RRR-型，即D-型）是单一的立体异构体；而合成dl-α-生育酚是由八个不同的立体异构体分子的混合物，在这8个立体异构体中每种异构体占12.5%，只有一种与天然形式的是完全相同的，其它七个天然中并不存在。（3）生物活性差异：关于天然d-α-生育酚比合成dl-α-生育酚具有更高的生物活性已成定论，FDA（美国食品与药品管理局）、WHO（世界卫生组织）、USP（美国药典）等认为天然品比合成品的生物活性高36%，该差异是二十世纪五十年代通过“鼠胎吸收法”测定的；而非α-生育酚的活性只有α-生育酚的几十分之一至几分之一。α-生育酚是一种有效的抗氧化剂，可以延缓衰老，抑制肿瘤，抗心血管病，降低血压等生理功能，也可以起到美容作用。目前对维生素E的认识存在二个误区，一方面检验机构测定的是维生素E的总量，对是d-α型还是dl-α型的量无法进行检测；另一方面生产企业其产品所标识的也是总生育酚含量，不标明所添加的维生素E是d-α型还是dl-α型，消费者无法知道其中真正功效成分d-α-生育酚的含量。因此，建立一套准确有效的分析方法获取食品中d-α-生育酚的数据，使消费者知道其中真正功效成分d-α-生育酚的含量，对规范食品中维生素Ｅ的营养标识和规范市场特别是保健食品行业起到一定的作用。

关于维生素E的分析报道较多，主要有比色法、荧光法、薄层层析法、气相色谱法及高效液相色谱法等。这些方法中（1）比色法：此法操作简单，灵敏度较高；但由于维生素E没有特异反应，需要采用一些方法除去干扰。（2）荧光法：此法特异性强、干扰少、灵敏、快速、简单，但分析结果实际上只是α-E的值。（3）薄层层析法：此法同荧光法类似，也只适用于α-E的测定。（4）气相色谱法：此法目前虽能正确定量维生素E，但是对不同型分离困难，同时胆固醇等硬脂类对测定有干扰。（5）高效液相色谱法：为各国维生素E的首选分析方法，但当食物中的β型或γ型维生素E含量较少时，β型和γ型维生素E的两峰重叠，并且dl-α-生育酚8个异构体峰都重叠。这些方法所有测定结果都为对α-生育酚进行定量，未对d-α-生育酚和l-α-生育酚的量进行有效的测定，目前国内还未有对食品中d-α-生育酚测定方法的分析报道。

发明内容

本发明的目的是克服上述背景技术的不足，提供一种检测食品中d-α-生育酚和l-α-生育酚的气相色谱方法，该方法具有特异性强，操作简便，抗干扰能力好、准确度高的特点，适合食品中d-α-生育酚和l-α-生育酚含量的测定。

为了达到上述目的，发明人进行了广泛深入的研究试验，确定了以下的技术方案：

一种检测食品中d-α-生育酚和l-α-生育酚的气相色谱方法，按照以下步骤进行：

1）、样品制备：

称取1～10g（精确到0.01g）食品于皂化瓶中，加入5mL抗坏血酸溶液、10mL氢氧化钾溶液和30mL无水乙醇充分混匀后，于沸水浴回流20～40min，冷却到室温后，将皂化液移入分液漏斗中；接着清洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗；

2）、浓缩：将上述提取液过无水硫酸钠柱干燥，于水浴中充氮保护旋转浓缩至近干，氮气吹干，用甲醇溶解、混合、并定容至2.00mL，然后上离心机离心分离5min，取上清液待测离心待测；

3）、上机检测：将上述待测液输入配有氢火焰检测器的气相色谱检测。