[发明专利]一株球状红球菌WJ4及其在邻苯二甲酸酯污染土壤修复中的应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，尤其涉及一株球状红球菌WJ4及其在邻苯二甲酸酯污染土壤修复中的应用。 

背景技术

邻苯二甲酸酯（Phthalate ester acids，PAEs）作为一类主要的增塑剂，广泛分用于塑料制品中，并随着这些物品的生产、使用和处理而分布于各类环境介质中，土壤被认为是PAEs最大的库和汇。PAEs污染土壤的微生物修复技术中需要解决的首要问题是高效降解菌株的筛选和构建。Chang等筛选出两株对邻苯二甲酸酯具有降解效果的鞘胺醇单胞菌属(Sphigomonas)和棒状杆菌(Corynebacterium），Zeng和Carrara研究发表明假单胞菌和枯草芽孢杆菌对DEHP具有较好的降解效果，另有许多学者分离出多种具有降解短链PAEs功能的红球菌属细菌菌株。但是，有关能降解DEHP的球状红球菌种质资源很少被发现。目前关于球状红球菌对DEHP污染土壤的修复效果尚无报道。鉴此，本专利从PAEs污染设施菜地土壤中分离筛选出一株对DEHP具有良好降解性能的球状红球菌WJ4，研究了该菌对DEHP污染土壤的修复效应，为进一步研发PAEs污染土壤的生物修复提供了科学依据和新思路，具有十分广泛的应用潜力。 

发明内容

解决的技术问题：本发明的目的在于针对生产实践中的实际问题和需求，提供了一种能够降解邻苯二甲酸酯（如DEHP）的微生物资源，该菌株为球状红球菌（Rhodococcus globerulus strain）WJ4CGMCC No.7965，该菌株能够以DEHP为唯一碳源进行好氧降解，在以DEHP（200mg/L）为唯一碳源的基础盐液体培养基中培养7d后，其对DEHP的降解达到96.4%。该菌接种于土壤21d后，土壤DEHP的降解可达57.5%，该菌株在DEHP污染土壤的生物修复中具有较好的应用前景。 

技术方案：一株球状红球菌（Rhodococcus globerulus）WJ4，该菌株已在国家知识产权局指定的保藏单位保藏，保藏日期为2013年7月24日，保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号：CGMCC No.7965。 

球状红球菌（Rhodococcus globerulus）WJ4在修复邻苯二甲酸酯污染土壤中的应用。 

球状红球菌（Rhodococcus globerulus）WJ4在修复DEHP、DnBP和DnOP污染土壤中的 应用。 

球状红球菌（Rhodococcus globerulus）WJ4在生物修复邻苯二甲酸酯污染土壤中的应用，将球状红球菌（Rhodococcus globerulus）WJ4菌株接种于LB液体培养基培养中，振荡培养至对数期；将上述菌悬液按土壤10％wt的接种量接入邻苯二甲酸酯污染土壤中，30℃避光培养。 

球状红球菌（Rhodococcus globerulus）WJ4的无机盐基础培养基，组成为：NH₄NO₃1.0g，MgSO₄·7H₂O0.5g，CaCl₂·2H₂O10mg，(NH₄)₂SO₄0.5g，KH₂PO₄0.5g，NaCl0.5g，K₂HPO₄1.5g，MnSO₄·H₂O20mg，微量元素溶液1mL，加超纯水至1L，pH7.0；微量元素溶液：每升添加FeSO₄·7H₂O2.0g，MnSO₄·H₂O2.0g，ZnSO₄·7H₂O0.5g，Na₂MoSO₄·2H₂O0.5g，CuSO₄·5H₂O0.4g，NiCl₂·6H₂O0.2g和H₃BO₄0.20g。