[发明专利]一种异鼠李素的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种异鼠李素的制备方法。

背景技术

异鼠李素为黄酮类物质，CAS号为480-19-3，分子式C16H12O7，分子量316.26，分子结构式：

    异鼠李素化学名为3,5,7-三羟基-2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)苯并吡喃-4-酮，具有具有提高微血管血流量、抗氧化、抗炎、抗过敏及调节免疫功能等。沙棘果为胡颓子科沙棘属植物沙棘HippophaaerhamnoidesI 的果实，又名醋柳果，酸刺果沙棘具有很高的药用价值。《中药大字典》记载，沙棘具有活血散淤、化痰宽胸、补脾健胃、生津止渴、清热止泻之效，同时对多种疾病都有一定的治疗作用。沙棘果中提取的总黄酮（TFH），是含有7种黄酮的一组化合物，其中含量较高的为异鼠李素及槲皮素，沙棘总黄酮可使心绞痛缓解，心功能及缺血性心电图好转，这与TFH具有增加冠状动脉血流量、增加心肌营养血流量、降低心肌耗氧量、抑制血小板聚集等作用有关。

    通过文献检索，现有从沙棘果中制备异鼠李素的方法操作一般比较复杂，尤其是高纯度的异鼠李素制备方法，多采用硅胶柱分离，很难实现工业化生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单、易于工业化的异鼠李素的制备方法。

本发明技术方案通过以下内容来实现的：

    一种异鼠李素的制备方法，其特征在于：取沙棘果渣加适量生物酶，酶解2-5小时，加5-10倍量饱和石灰水充分搅拌提取，提取2-3次，提取液过滤调节ph3-4加入大孔树脂中吸附，依次水乙醇梯度洗脱，收集洗脱液回收乙醇，放置结晶，离心得粗结晶物60-80%乙醇溶液回流溶解结晶2-3次，结晶物再用乙酸乙酯溶解结晶即得。

所述的生物酶为淀粉酶、果胶酶和纤维素酶中的一种，用量为原料量的1-5‰。

所述的大孔树脂可选D101、HPD100、HZ816和ADS-21大孔树脂中的一种。

   所述的水醇梯度为4-7倍柱体积30-50%乙醇洗脱杂质，5-10柱体积50-80%乙醇溶液洗脱。

本方法采用酶解、石灰水及大孔树脂相结合制备异鼠李素，工艺操作简单，生产成本低，，所得产品纯度高，易于工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取沙棘果渣10kg加适量20g果胶酶，酶解4小时，加7倍量饱和石灰水充分搅拌提取2小时，提取3次，提取液合并过滤后调节ph3加入HPD100大孔树脂中吸附，先用7倍柱体积40%乙醇洗脱杂质，8柱体积55%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液回收乙醇至醇浓度30%，放置结晶，离心，结晶物70%乙醇溶液回流溶解结晶3次，结晶物再用乙酸乙酯溶解结晶，干燥得异鼠李素40g，经HPLC检测，含量98.5%。

实施例2：

取沙棘果渣10kg加适量30g淀粉酶，酶解3小时，加8倍量饱和石灰水充分搅拌提取2小时，提取3次，提取液合并过滤后调节ph4加入HZ816大孔树脂中吸附，先用7倍柱体积30%乙醇洗脱杂质，8柱体积60%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液回收乙醇至醇浓度30%，放置结晶，离心，结晶物65%乙醇溶液回流溶解结晶3次，结晶物再用乙酸乙酯溶解结晶，干燥得异鼠李素46g，经HPLC检测，含量98.2%。

实施例3：

取沙棘果渣10kg加适量40g纤维素酶，酶解2小时，加5倍量饱和石灰水充分搅拌提取2小时，提取3次，提取液合并过滤后调节ph4加入ADS-21大孔树脂中吸附，先用5倍柱体积40%乙醇洗脱杂质，7柱体积65%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液回收乙醇至醇浓度20%，放置结晶，离心，结晶80%乙醇溶液回流溶解结晶3次，结晶物再用乙酸乙酯溶解结晶，干燥得异鼠李素52g，经HPLC检测，含量97.8%。