[发明专利]显色剂的稳定剂及其用途

说明书

技术领域

本分案申请为申请号200980106670.9(国际申请号PCT／JP2009／055296)、申请日2009年3月18日的发明专利的分案申请，该发明专利申请的发明名称为“显色剂的稳定剂及其用途”。

技术领域

本发明涉及使显色剂10-(羧甲基氨基羰基)-3，7-双(二甲基氨基)吩噻嗪或者其衍生物、或其盐稳定化的稳定剂及其用途。

背景技术

作为目标成分的测定(定性、定量)方法，广泛应用利用了氧化还原反应的酶法。该方法是如下所述的方法：例如，由待测的目标成分生成氧化物质，利用氧化酶使该氧化物质与通过氧化生成显色化合物的显色剂反应，测定所产生的显色的吸光度。该方法中，吸光度的大小与所生成的显色化合物的量相当，所生成的前述显色化合物的量与所生成的氧化物质的量相当，前述氧化物质的量与目标成分的量相当。也就是说，通过检测所产生的显色(所生成的显色化合物)，能够借助这样的氧化还原反应来间接地测定目标成分。

作为这样的通过氧化而显色的显色剂，已知有通过氧化而使作为显色团的亚甲基蓝游离的10-(羧甲基氨基羰基)-3，7-双(二甲基氨基)吩噻嗪。对于该显色剂，由于亚甲基蓝不易因为再还原而退色，因而能够进行高灵敏度的检测，期望用于各种分析中。

该显色剂在如前所述的氧化还原反应中使用时，例如，由于处理性容易，因而能够以溶解于水、缓冲液等溶剂中而成的液体试剂(湿系)形式保存至使用时。另外，为了实现仅添加试样就能够开始前述氧化还原反应，以将前述显色剂固定化在多孔体等基材上的试验片(干系)形式保持至使用时。然而，该显色剂非常不稳定，如前所述，具有在由于添加酶而导致的人为的氧化还原反应开始前、即在保存时产生自然显色这样的问题。其原因被推测是由于：例如在前述湿系的情况下，前述溶剂中前述显色剂变得不稳定，在干系的情况下，由于吸收空气中的水分，因而前述显色剂变得不稳定等。另外，不论湿系还是干系，在紫外线等光照射条件下保存时，前述显色剂也会不稳定化而产生自然显色，这也被视为问题。

这样，前述显色剂自然显色时，在实际使用中，由于自然显色导致的亚甲基蓝的游离的缘故，有可能吸光度测定中的背景上升，测定精度降低。特别是，前述显色剂中，游离的亚甲基蓝具有如前述那样不易退色的性质。为此，虽然具有高灵敏度这样的优点，但另一方面，与其他显色团相比，通过自然氧化而游离的显色团(亚甲基蓝)不易退色，因而存在难以回避该影响的问题。在将前述显色剂以液体状态保存的情况下，例如，在约1天左右，确认到对测定有影响的自然显色，在约3天左右，难以用作分析用试剂(专利文献1)。

为了防止这样的自然显色导致的影响，每次测定时，需要调制前述显色剂试剂，这样操作变得复杂，成本也变高。

专利文献1：日本特开平4-27839

发明内容

因此，本发明的目的在于，提供即使在例如水分存在下或光照射的条件下也能够使10-(羧甲基氨基羰基)-3，7-双(二甲基氨基)吩噻嗪或者其衍生物、或其盐稳定化的稳定剂。

本发明的稳定剂的特征在于，其是10-(羧甲基氨基羰基)-3，7-双(二甲基氨基)吩噻嗪或者其衍生物、或其盐的稳定剂，其包含下述(1)和(2)中的至少一种化合物。

(1)具有碳原子数8～16的烷基的表面活性剂

(2)选自由下述式(I)所表示的化合物、下述式(II)所表示的化合物以及类黄酮系色素所组成的组中的至少一种色素物质

R¹-N=N-R²…(I)

前述式(I)中，

R¹是

R²是

R¹以及R²中，

X为氢、卤素、钠或钾，各X可以相同也可以不同，

Y为氢或SO₃X，各Y可以相同也可以不同，

Z为氢、甲基或甲氧基，各Z可以相同也可以不同。

前述式(II)中，

X为氢、卤素、钠或钾，各X可以相同也可以不同，

Y为氢、卤素、钠或钾，各Y可以相同也可以不同。

本发明的显色试剂的特征在于，其为包含10-(羧甲基氨基羰基)-3，7-双(二甲基氨基)吩噻嗪或者其衍生物、或其盐的显色试剂，进一步包含本发明的稳定剂。