[发明专利]一株能生物合成1,2‑二氢睾内酯(testololactone)的简单青霉及合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程领域，本发明涉及一种生物合成1，2-二氢睾内酯(testololactone)的菌株及合成方法。

背景技术

1，2-二氢睾内酯，英文名为testololactone，化学式为C₁₉H₂₄O₃，分子量为302.41，白色或类白色粉末，CAS4416-57-3。1，2-二氢睾内酯作为一类激素类药物，是第一代芳香酶抑制剂。它能够抑制体内雌激素如雌二醇、雌酚酮的合成，使雌激素的产生减少，血液中雌激素的水平降低，用于假性性早熟的治疗。此外，它的衍生物在临床上用作细胞抗癌药和治疗男性不育等疾病(Dao T L.Estrogen synthesis in human breast tumor and its inhibition by testololactone and bromoandrostenedione.Cancer Research，1982，42：3338-3341；Cocconi G.First generation aromatase inhibitors--aminoglutethimide and testololactone.Breast cancer research and treatment，1994，30：57-80)。

通过化学合成法和微生物转化法均可制备1,2-二氢睾内酯(testololactone)。有机化学合成上主要采用过氧化剂，但传统氧化剂大多是有毒和／或易爆的，对环境污染大(Zinczuk J，Bacigaluppo J A，Colombo M I.An efficient and environmentally benign chemical synthesis of testolactone.Journal of the Brazilian Chemical Society，2003，14：970-974)。微生物转化法制备1，2-二氢睾内酯条件温和，有环境友好性，因而具有较大的应用前景。到目前为止，能催化雄甾烷或孕甾烷甾体化合物生成1,2-二氢睾内酯的微生物主要为青霉和曲霉，例如黄绿青霉以孕酮，雄甾-4-烯-3，17-二酮等为底物制备1，2-二氢睾内酯，(Liu H M，Li H P，Shan L H.Synthesis of steroidal lactone by penicillium citreo-viride.Steroids，2006，71(11-12)：931-934)，其底物投料浓度为1g／L，转化时间5天，1,2-二氢睾内酯最高产率为73％；卡地干酪青霉以孕酮，3β-羟基-5-雄烯-17-酮，雄甾-4-烯-3，17-二酮等为底物制备1，2-二氢睾内酯，(Kolek T，Szpineter A，S'wizdor A.Studies on Baeyer-Villiger oxidation of steroids：DHEA and pregnenolone D-lactonization pathways in Penicillium camemberti AM83.Steroids，2009，74：859-862)，其底物投料浓度仅为0.67g／L；溜曲霉转化17a-羟基孕酮，脱氧皮质酮为1,2-二氢睾内酯，底物投料 浓度低，副产物多且产率低(Hunter A C，Carragher N E.Flexibility of the endogenous progesterone lactonisation pathway in Aspergillus tamarii KITA：transformation of a series of cortical steroid analogues.Journal of Steroid Biochemistry&Molecular Biology，2003，87：301-308)。尽管已有上述研究，并取得了相应的研究成果，但是存在底物投料浓度低，转化时间长，副产物多等问题，仍需要探索利用不同菌种转化不同甾体底物制备1,2-二氢睾内酯的研究，从而提高投料浓度和产率，以进一步降低生产成本，同时减少对环境的污染。