[发明专利]包装流感病毒载体的信号

权利要求书

1.用于重组流感病毒vRNA表达和包装的载体，该载体包含：i)具有流感病毒HA vRNA的3’非编码序列和N-末端HA编码序列的3’HA导入序列，ii)包含异源开放阅读框的异源核酸片段，和iii)具有C-末端HA编码序列和流感病毒HA vRNA的5’ 非编码序列的5’ HA导入序列，

其中，C-末端HA编码序列包含对应于C-末端HA编码序列的80至518的任意整数个核苷酸的序列，并且其中N-末端HA编码序列对应于N-末端HA编码序列的9至468的任意整数个核苷酸，其中所述载体中的HA编码序列相对于野生型HA编码序列具有内部缺失。

2.根据权利要求1所述的载体，其中C-末端HA编码序列包括C-末端HA编码序列的291至518个核苷酸。

3.根据权利要求1所述的载体，其中所述异源核酸片段包含与内部核糖体入口序列对应的序列。

4.根据权利要求1所述的载体，其中所述异源核酸片段包含与标记基因开放阅读框对应的序列。

5.根据权利要求1所述的载体，其中所述异源核酸片段包含与病原体免疫原性蛋白或肽或治疗性蛋白的开放阅读框对应的序列。

6.根据权利要求1所述的载体，其中所述导入序列来自于A型流感病毒。

7.根据权利要求1所述的载体，其中所述导入序列来自于B型流感病毒。

8.根据权利要求1所述的载体，其中所述异源核酸片段与另一核酸片段融合以编码融合蛋白。

9.根据权利要求1所述的载体，其中所述C-末端HA编码序列包含对应于末端最多268个核苷酸的序列。

10.根据权利要求1所述的载体，其中所述C-末端HA编码序列包含对应于末端最多291个核苷酸的序列。

11.根据权利要求1所述的载体，其中所述N-末端HA编码序列对应于核苷酸9～15。

12.根据权利要求1所述的载体，其中所述N-末端HA编码序列对应于核苷酸9～216。

13.根据权利要求1所述的载体，其中与所述载体对应的vRNA当在细胞中存在时以是相应野生型vRNA的至少10％的效率包装入病毒颗粒中。

14.根据权利要求1所述的载体，其中与所述载体对应的vRNA当在细胞中存在时以是相应野生型vRNA的至少30％的效率包装入病毒颗粒中。

15.根据权利要求1所述的载体，其中与所述载体对应的vRNA当在细胞中存在时以是相应野生型vRNA的至少60％的效率包装入病毒颗粒中。

16.包含与根据权利要求1所述的载体对应的vRNA的重组流感病毒。

17.根据权利要求16所述的重组病毒，其中所述异源核酸片段包含与标记基因开放阅读框对应的序列。

18.根据权利要求16所述的重组病毒，其中所述异源核酸片段包含与病原体免疫原性蛋白或肽的开放阅读框对应的序列。

19.根据权利要求18所述的重组病毒，其中所述开放阅读框编码病原体免疫原性蛋白。

20.根据权利要求18所述的重组病毒，其中所述开放阅读框编码流感病毒NA蛋白。

21.根据权利要求16所述的重组病毒，其中所述异源核酸片段包含与跨膜蛋白开放阅读框对应的序列。

22.根据权利要求16所述的重组病毒，其中所述异源核酸片段包含与蛋白开放阅读框对应的序列，该蛋白具有膜融合活性。

23.根据权利要求16所述的重组病毒，其中所述异源核酸片段包含与病毒衣壳蛋白开放阅读框对应的序列。

24.根据权利要求16所述的重组病毒，其中所述异源核酸片段包含与水泡性口炎病毒G蛋白开放阅读框对应的序列。

25.根据权利要求16所述的重组病毒，其中所述异源核酸片段包含与治疗性蛋白开放阅读框对应的序列。

26.根据权利要求19所述的重组病毒，其中所述流感病毒HA蛋白为B型HA蛋白。

27.在细胞中表达异源核酸片段的方法，该方法包括：让细胞与根据权利要求16所述的重组病毒接触，检测或测定细胞中是否有所述异源核酸片段编码的产物表达。