[发明专利]一种具有抗病毒活性的对虾蛋白及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种活性蛋白及其应用，尤其涉及一种具有抗病毒活性的对虾蛋白以及此蛋白在生物抗病毒感染或者治疗中的应用，属生物技术领域。 

背景技术

病毒可以分为真病毒与亚病毒两大类，其中真病毒根据病毒核酸的类型，又可以进一步分为DNA病毒和RNA病毒两大类。病毒病具有潜伏期长，传播途径复杂，发病猛烈，缺少特异治疗药物等特点，是目前危害生物体健康的重要疾病类型。 

对脊椎动物而言，利用疫苗进行防疫是预防多种病毒性疾病的重要方法，除此之外，还可采用的一些抗病毒药物如碘脱氧尿嘧啶核苷（疱疹净）、阿糖腺苷、无环鸟苷及干扰素等抗病毒药物进行治疗。而无脊椎经济动物，植物和其它低等生物缺乏适应性免疫，不能利用疫苗防疫的方法预防病毒性疾病，加大了治疗的难度与效果。故而寻找与发现广谱，高效的病毒防治药物是医药研究人员的重要任务之一。 

在受到病毒侵染时，生物体会启动自身的某些抗病毒机制，产生抗病毒因子，对抗病毒的入侵。寻找生物体自身的抗病毒效应因子并且加以开发利用是抗病毒药物研发的重要手段之一，其中干扰素在高等动物抗病毒中的应用便是典型实例。基于此，申请人通过对节肢动物对虾的研究发现，其体内存在一种活性蛋白，具有较明显的过氧化氢还原酶的能力与抑制生体内病毒复制，提高生物体存活率的功能。经检索，其序列和在虾、蟹等动物抗病毒感染或治疗中的应用未见报道。 

发明内容

本发明的目的是提供一种具有抗病毒活性的对虾蛋白以及此蛋白在生物抗病毒感染或者治疗中的应用。 

本发明所述具有抗病毒活性的对虾蛋白，其特征在于：它具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。具体信息为： 

(a)序列特征 

*长度：217氨基酸 

*类型：氨基酸 

*链型：单链 

（b）分子类型：蛋白质 

（c）序列描述：SEQ ID NO.1。 

本发明还提供了一种编码上述对虾蛋白的核苷酸，其特征在于：它具有SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。具体信息为： 

(a)序列特征 

*长度：651碱基 

*类型：碱基 

*链型：单链 

（b）分子类型：核酸 

（c）序列描述：SEQ ID NO.2。 

本发明所述具有抗病毒活性的对虾蛋白可以通过送至生物公司合成或利用自动多肽合成仪合成全序列，不需任何修饰。 

本发明所述具有抗病毒活性的对虾蛋白还可以通过氨基酸与密码子的对应关系反推出编码该蛋白的核酸序列，然后人工合成相应的核酸系列，利用基因工程的手段获得该蛋白。 

本发明所述具有抗病毒活性的对虾蛋白还可以通过提取对虾的总RNA，逆转录成cDNA，根据本发明提供SEQ ID NO：2设计PCR引物，利用基因克隆的常规方法获得核酸序列，然后利用基因工程手段进行原核或者真核重组表达系统获得蛋白，见实施例1。鉴于此蛋白在不同生物中具有高度的保守性，不排除通过利用本发明提供SEQ ID NO：2与其它物种喜爱的密码子设计兼并引物，在其它物种中利用基因克隆和基因工程的手段获得与本发明所述蛋白高度同源的蛋白序列。 

本发明所述具有抗病毒活性的对虾蛋白还可以通过制备与利用本蛋白的多克隆或者单克隆抗体自不同生物体内分离纯化获得。 

本发明所述具有抗病毒活性的对虾蛋白在虾、蟹抗病毒感染或治疗中的应用。 

其中：所述病毒是DNA病毒，RNA病毒，逆转录病毒等，优选是双链DNA病毒。其中双链DNA病毒中优选是对虾白斑综合症病毒。 

利用过氧化氢酶检测试剂盒（S0051）对本发明所述的对虾蛋白进行还原过氧化氢的活性检测，以及利用基因工程的手段将本发明所述的对虾蛋白在原核系统中表达，并进一步亲和纯化后制得具有生物活性的蛋白纯化产物而实施的动物体内注射实验表明：本发明所述的对虾蛋白具有较明显的过氧化氢还原酶的能力与抑制生物体内病毒复制，降低病毒感染提高生物体存活率的功能，有望开发成为新型抗病毒药物。 

本发明所述具有抗病毒活性的对虾蛋白应用的方法与途径优选是：将该蛋白体内注射、外用、口服、与添加剂共同饲喂或者利用药用载体制备成体内或体外给药的制剂。