[发明专利]一种地高辛单抗检测内源性洋地黄样因子含量的试剂盒及使用方法

权利要求书

1.一种地高辛单克隆抗体检测内源性洋地黄样因子含量的试剂盒，其特征在于：包括如下组份

一抗地高辛单克隆抗体、二抗兔抗鼠IgG、³H标记乌本苷、聚乙二醇4000、pH=7.4的磷酸缓冲液、³H闪烁液、pH=7.4的Tris缓冲液。

2.根据权利要求1所述的地高辛单克隆抗体检测内源性洋地黄样因子含量的试剂盒，其特征在于：还包括乌本苷。

3.根据权利要求1所述的地高辛单克隆抗体检测内源性洋地黄样因子含量的试剂盒，其特征在于：所述一抗地高辛单抗10纳克/毫升、二抗兔抗鼠IgG2.3×10^-8摩尔/升，所述³H标记乌本苷浓度为10.0Ci/mmol，所述聚乙二醇4000浓度为30wt%。

4.根据权利要求1所述的地高辛单抗检测内源性洋地黄样因子含量的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒用于检测人体血清、胎盘组织分泌液、以及冷冻胎盘组织中的内源性洋地黄样因子的含量。

5.一种如权利要求1所述的地高辛单抗检测内源性洋地黄样因子含量的试剂盒的使用方法，其特征在于：步骤如下

(1)采集胎盘，切碎，液氮冷冻，保存于-80℃；

(2)将冷冻胎盘组织块切成薄片，置于匀浆器中，放入液氮罐中冷冻1分钟；以1500rpm的速度将组织薄片匀浆5分钟；

(3)收集匀浆组织，加入等量的甲醇，混匀，离心去除蛋白；收集离心上清液，真空浓缩，4℃保存；

(4)取出试剂盒中地高辛单克隆抗体、二抗兔抗鼠IgG、³H标记乌本苷、pH=7.4的三羟甲基氨基甲烷缓冲液，分别等量加入，与等量待测样品充分混合，室温孵育；

(5)再加入等量的PEG4000溶液，离心，得到沉淀物；

(6)沉淀物用500微升pH7.4的PBS重悬，加入³H闪烁液；

(7)测量样品放射量，根据标准曲线计算出样品中所含内源性洋地黄样因子的浓度。