[发明专利]一种刺梨酸的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术化学领域，特别涉及一种刺梨酸的制备方法。

背景技术

刺梨为蔷薇科植物刺梨的果实，别名茨梨，刺梨果实营养丰富，誉为“营养库”，含维生素（还含β-谷甾醇（β-sitosterol），委陵菜酸（tomentic acid），野雅春酸（euscaphic acid）， 原儿茶酸（procatechuic acid），以硬脂酸及二十一烷酸为主的脂肪酸，刺梨酸（roxburic acid）又叫2β，3a，7β，19a-四羟基-12-乌苏烯-28-羧酸（2β，3a，7β，19a-tetrahydroxyursolu-12-ene-28-car-boxylic acid）等成分，具有降血压、抗氧化及抗肿瘤等作用。

刺梨酸为五环三萜类化合物，分子是C30H48O6，分子量504.71，研究发现具有抗肿瘤作用。

通过文献检索，现有刺梨酸制备方法是采用有硅胶分离方法。由于操作复杂，制备量较小，样品得率低，很难实现工业化生产。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种操作简便的刺梨酸的制备方法。

    为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：一种刺梨酸的制备方法，其特征在于以下步骤：

    1）取干燥刺梨果粉碎，加入5-10倍量70%-99%乙醇溶液，回流提取2-3次，提取液缩至无醇加入大孔树脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物；

2）所得粗提物用5-10倍量70%-80%乙醇溶解，加入活性炭脱色，滤液浓缩至醇浓度30%-50%置结晶，结晶物再用90%-95%乙醇溶液加热溶解结晶2-3次，干燥即得。

    所述的大孔树脂可选AB-8、D101、HZ816、HPD100中的一种。

所述的乙醇溶液梯度洗脱为先用5-10倍柱体积20%-50%乙醇洗脱，再用5-10倍柱体积70%-90%乙醇溶液洗脱。

采用本法生产刺梨酸，工艺简便易操作，产品纯度高，易于实现工业化制备。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

    取干燥刺梨果5kg粉碎，加10倍量90%乙醇溶液，回流提取2次，提取液缩至无醇，加适量水稀释，加入AB-8大孔树脂中吸附，先用7倍柱体积40%乙醇洗脱，再用8倍柱体积80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩至400ml，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物。所得粗提物用10倍量70%乙醇溶解，加入20g活性炭脱色，滤除活性炭，滤液浓缩至醇浓度40%置结晶，结晶物再用90%乙醇溶液加热溶解结晶3次，干燥得刺梨酸4.2g，经HPLC检测，含量98.2%。

实施例2：

   取干燥刺梨果5kg粉碎，加5倍量70%乙醇溶液，回流提取3次，提取液缩至无醇，加适量水稀释，加入D101大孔树脂中吸附，先用5倍柱体积30%乙醇洗脱，再用10倍柱体积90%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩至500ml，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物。所得粗提物用7倍量80%乙醇溶解，加入25g活性炭脱色，滤除活性炭，滤液浓缩至醇浓度30%置结晶，结晶物再用95%乙醇溶液加热溶解结晶3次，干燥得刺梨酸3.5g，经HPLC检测，含量95.8%。

实施例3：

   取干燥刺梨果5kg粉碎，加6倍量75%乙醇溶液，回流提取3次，提取液缩至无醇，加适量水稀释，加入HZ816大孔树脂中吸附，先用7倍柱体积30%乙醇洗脱，再用8倍柱体积80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩至300ml，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物。所得粗提物用7倍量80%乙醇溶解，加入20g活性炭脱色，滤除活性炭，滤液浓缩至醇浓度40%置结晶，结晶物再用90%乙醇溶液加热溶解结晶3次，干燥得刺梨酸3.8g，经HPLC检测，含量97.8%。

实施例4：

   取干燥刺梨果5kg粉碎，加7倍量75%乙醇溶液，回流提取3次，提取液缩至无醇，加适量水稀释，加入HPD100大孔树脂中吸附，先用6倍柱体积40%乙醇洗脱，再用5倍柱体积90%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩至200ml，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物。所得粗提物用10倍量80%乙醇溶解，加入20g活性炭脱色，滤除活性炭，滤液浓缩至醇浓度30%置结晶，结晶物再用95%乙醇溶液加热溶解结晶2次，干燥得刺梨酸4.5g，经HPLC检测，含量96.3%。