[发明专利]一种高纯度灵芝酮三醇的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别涉及一种高纯度灵芝酮三醇的制备方法。

背景技术

灵芝酮三醇为三萜类化合物，CAS号106518-63-2，分子式C30H48O4，分子量4722.7,分子结构式如下：

灵芝酮三醇为灵芝中的三萜类成分，三萜类也是灵芝的有效成分之一，对人肝癌细胞具有细胞毒作用，也能抑制组织胺的释放，具有保肝作用和具有抗过敏作用等。

通过文献检索，现有灵芝酮三醇制备方法是采用硅胶、凝胶色谱法进行分乙醇提回流提取，醋酸乙酯萃取，硅胶、凝胶色谱法进行分离等步骤。由于操作复杂，制备量较小，样品得率低，不适合高纯度灵芝酮三醇的制备。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种操作简便的高纯度灵芝酮三醇的制备方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种高纯度灵芝酮三醇的制备方法，其特征在于以下步骤：取灵芝原料原料粉碎，加入5-10倍量50%-99%甲醇溶液，超声提取2-3次，提取液缩后加入大孔树脂柱中吸附，先用3-9倍量10%-50%甲醇溶液洗脱，再用5-10倍60%-90%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节ph1-3，加入石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，所得固体用高速逆流色谱仪分离，收集流分减压干燥即得。

所述的大孔树脂可选HZ816、HPD100、AB-8和D101中的一种。

所述的高速逆流色谱仪分离条件为：取石氯仿、甲醇、水，按3-7:2-5:1-3混合，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速700-1000rpm，流速为1-3ml/min。

采用本法制备灵芝酮三醇，工艺简便易操作，制备量大，产品得率高，而且低污染。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取灵芝原料粉碎，称20kg，用8倍90%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液减压浓缩后加入HZ816大孔树脂柱中吸附，用5倍柱体积50%甲醇溶液洗脱，再用8倍柱体积85%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节ph1，加入石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得固体粗提物。取氯仿、甲醇、水，按3:2:1混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速800rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，蒸发光散射检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得灵芝酮三醇1.2g，经HPLC检测，含量98.5%。

实施例2：

取灵芝原料粉碎，称20kg，用7倍80%甲醇溶液超声提取30分钟，提取2次，提取液减压浓缩后加入D101大孔树脂柱中吸附，用6倍柱体积30%甲醇溶液洗脱，再用8倍柱体积80%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节ph3，加入石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得固体粗提物。取氯仿、甲醇、水，按5:3:2混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速850rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，蒸发光散射检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得灵芝酮三醇1.3g，经HPLC检测，含量98.5%。

实施例3：

取灵芝原料粉碎，称20kg，用7倍85%甲醇溶液超声提取30分钟，提取2次，提取液减压浓缩后加入AB-8大孔树脂柱中吸附，用4倍柱体积40%甲醇溶液洗脱，再用10倍柱体积75%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节ph2，加入石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得固体粗提物。取氯仿、甲醇、水，按4:3:2混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速700rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为1ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，蒸发光散射检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得灵芝酮三醇1.4g，经HPLC检测，含量98.3%。

实施例4：

取灵芝原料粉碎，称20kg，用7倍95%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液减压浓缩后加入HPD100大孔树脂柱中吸附，用5倍柱体积50%甲醇溶液洗脱，再用10倍柱体积70%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节ph1，加入石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得固体粗提物。取氯仿、甲醇、水，按4:2:2混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速850rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，蒸发光散射检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得灵芝酮三醇1.3g，经HPLC检测，含量97.7%。