[发明专利]一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂及其用途

说明书

一种含蟾皮转胶蛋白‑2的抗肿瘤中药制剂及其用途，属于生物医药技术领域。其特征在于：蟾皮转胶蛋白‑2 17‑36%、辅料2‑11%、稳定剂5‑19%、溶剂41‑70%。上述一种含蟾皮转胶蛋白‑2的抗肿瘤中药制剂，以天然的蟾皮转胶蛋白‑2为活性成分和载体，添加一定量的蛋白稳定剂，能很好的保证该药剂的疗效和性能的稳定，同时含有赋形和增效作用的辅料成分,能延长药物的有效期和稳定行，该中药制剂具有消肿止痛、抗肿瘤和预防人体、动物、家禽细胞恶性增殖等作用，且生产简便，安全无毒，使用方便，使用过程无任何副作用。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体为一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂及其用途。

背景技术

蟾酥、蟾衣、蟾皮等在我国作为中药材历史悠久，具有消肿、止痛、解毒、开窍醒神、抗肿瘤等疗效。对蟾酥不同溶剂萃取物进行初步免疫活性筛选的过程中已经证明总水提蛋白组分在体外具有一定的免疫增强活性以及促进肿瘤细胞凋亡的功能。浙江农林大学所在团队开展日本蟾蜍 (Bufo japonicus formosus) 皮肤cDNA质粒文库筛选工作，克隆到缺失部分5′-端开放阅读框 (open reading frame, ORF) 碱基序列的转胶蛋白-2(transgelin-2, TAGLN2，又称smooth muscle 22，SM22β) cDNA。该蛋白最初是从鸡砂囊平滑肌中发现并分离而来，分子量22 kD，是一种与肌动蛋白 (actin) 结合的细胞骨架蛋白，参与动物发育过程中的细胞增殖、分化以及脉管系统的发育，在多种癌症发生过程中亦大量表达。因此，TAGLN2作为肿瘤发生的潜在标志物，为肿瘤的早期诊断、治疗和监测等提供参考依据。为分析蟾蜍皮肤中是否存在TAGLN2全长基因的表达，通过两轮PCR的实验设计，获得多个不同程度缺失5′-端碱基序列的cDNA克隆，揭示TAGLN2基因多样性。为研究分析该蛋白在蟾酥、蟾衣、蟾皮的含量及其在抗肿瘤方面的效果奠定基础。

发明内容

针对现有技术中存在的各种问题，本发明的目的在于设计提供一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂及其用途的技术方案，所得制剂制备方法简单、安全有效、生产成本低、疗效显著、应用简便。

所述的一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂，其特征在于含有重量百分含量的以下物质：蟾皮转胶蛋白-2 17-36%、辅料2-11%、稳定剂5-19%、溶剂41-70%；所述的辅料为聚山梨酯、聚氧乙烯蓖麻油、聚乳酸、葡聚糖中的一种或一种以上混合物；所述的稳定剂为聚乙二醇、组氨酸、甘氨酸、甘油中的一种或一种以上混合物；所述的溶剂为蒸馏水、重蒸水、无菌水、超纯水、去离子水中的一种或一种以上混合物；

所述的蟾皮转胶蛋白-2采用以下方法制备：

1）从蟾蜍皮肤cDNA质粒文库筛选，克隆到缺失部分5′-端开放阅读框碱基序列的蟾皮转胶蛋白-2cDNA；

2）在原核表达系统一一大肠肝菌中表达和生产蟾皮转胶蛋白-2: 首先构建工程菌并诱导表达，然后高密度发酵工程菌并诱导表达，包涵体分离和洗涤后，将目的蛋白质复性、纯化。

所述的一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂，其特征在于蟾皮转胶蛋白-2的含量为21-33%，优选为23-29%。

所述的一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂，其特征在于辅料的含量为3-10%，优选为4-9%。

所述的一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂，其特征在于稳定剂的含量为7-17%，优选为9-15%。

所述的一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂，其特征在于溶剂的含量为45-68%，优选为47-64%。

所述的蟾皮转胶蛋白-2在制备用于人体、动物、家禽防治肿瘤等细胞恶性增殖制剂中的应用。