[发明专利]一种抗体效价的检测方法

权利要求书

1.一种抗体效价的检测方法，包括如下步骤：

1)将抗原偶联微球上，得到改性微球；

2)将改性微球与抗体溶液混合反应；

3)测定反应液的浊度，确定抗体效价。

2.一种抗CCP抗体效价的检测方法，包括如下步骤：

1)在CCP多肽上偶联特异性亲和小分子，在微球上偶联特异性亲和小分子的特异性靶标分子；

2)将修饰后的CCP多肽和微球混合，得到颗粒型CCP多肽抗原；

3)将颗粒型CCP多肽抗原与抗体溶液混合，反应；

4)测定反应体系的浊度，确定抗体效价。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：CCP多肽上偶联的特异性亲和小分子为生物素，微球上偶联的特异性靶标分子为链霉亲和素。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：在CCP多肽偶联生物素包括如下步骤：

1)将CCP多肽溶解于缓冲液中，酯化生物素用二甲基亚砜溶解，混合；

2)室温搅拌反应完全，去除未反应的生物素；

3)收集、纯化得到偶联生物素的CCP多肽。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：在CCP多肽偶联生物素包括如下步骤：

1)将CCP多肽溶解于pH9.0～9.6磷酸盐缓冲液中，4℃保存；将酯化生物素溶解2)二甲基亚砜；按生物素：CCP=10:1的摩尔比混合两种溶液；

3)室温搅拌4h，使用脱盐柱去除未反应的生物素；

4)用pH7.2～7.6的 PBS缓冲液洗脱，得到偶联生物素的CCP多肽。

6.根据权利要求4或5所述的检测方法，其特征在于：在微球上偶联链霉亲和素包括如下步骤：

1)将羧基化胶乳微球与乙磺酸缓冲液混合，加入EDC和NHS活化，洗涤得到活化微球；

2)将链霉亲和素溶解于PBS缓冲液中，加入活化微球，室温反应，反应完全后洗涤；

3)用赖氨酸封闭，得到SA修饰微球。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于：链霉亲和素溶解于pH6.8～7.8的PBS缓冲液中。

8.根据权利要求6或7所述的检测方法，其特征在于：EDC和NHS的摩尔比为1：（1～2）。