[发明专利]可注射蛋白基花样结构载药微纳材料与内耳跨膜给药缓释制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明介绍一种以白蛋白来制备多种花样结构微纳材料的方法及其在内跨膜载药方面的应用。涉及两种以上花样结构蛋白基载药微纳材料的制备技术与内耳跨圆窗膜给药缓释制剂及其制备方法。并指出可以携带一系列药物如激素类、神经营养因子类、抗自由基类、氨基糖甙类、颅内抗肿瘤类等药物。 

背景技术

内耳病(包括耳蜗与前庭系统)的临床发病率约占耳科疾病的近1/3，如突发性耳聋、自身免疫性内耳病及梅尼埃病等，可导致不同程度的感音神经性耳聋和平衡机能障碍，严重影响患者的工作能力与生活质量。 

长期以来临床上常采用全身给药治疗内耳病，其中糖皮质激素为有效的治疗药物之一。因高血压、糖尿病等系统性疾病则为全身激素治疗的禁忌，使得此类药物的应用受到限制。同时由于血一迷路屏障的存在，阻抑了药物在内耳的分布与扩散，导致治疗效果并不理想。内耳局部给药的研究一直受到耳科医师的关注。由于内耳与中耳之间存在一种膜性间隔即圆窗膜，其具有生物半透膜的性质，能允许多种药物通过，这使得药物可以不经过体循环而直接进入内耳即避免了血迷路屏障。目前常用的方法是通过鼓膜向鼓室内注射药物溶液的策略最具微创性。但该方法的局限性在于不能调控到达圆窗膜的药物浓度及难以有效控制药物与圆窗膜的接触时间，而后者是决定耳蜗内药物浓度的重要因素。结合近年来药物缓释剂型的发展，向鼓室内注射药物的缓释剂型体现了缓释技术与微创技术的结合，可能成为内耳疾病最优化的治疗方式，成为近年研究热点领域，鼓室跨膜给药缓释剂的研究尤为重要。迄今鼓室内药物治疗尚无 标准方案，临床应用亟待规范。因此，研制新型跨圆窗膜缓释制剂在耳内科学中具有十分重要的应用前景。在生物制药和组织工程迅猛发展的今天，控释系统作为新型的药物载体具有缓释、靶向、生物利用度高等特点，是一种非常有前途的控释系统。血清白蛋白是血浆中的蛋白质是当前的研究热点之一。其非糖基化的单链多肽包含585个氨基酸，分子量为66kD。其可以运输脂肪酸、胆色素、氨基酸、类固醇激素、金属离子和许多治疗分子等。本发明利用改良去溶剂法制备了两种以上花样结构蛋白基载药微纳材料并应用于内耳跨圆窗膜缓定向给药。 

由于迄今为止临床上还没有一种真正的内耳局部跨膜给药的缓释制剂在应用，而应用白蛋白制备蛋白基花样结构载药微纳材料作为新型跨圆窗膜的缓释药物载体在国内外均未见报道，故本发明有着广泛的应用前景。 

理想的耳用跨圆窗膜缓释制剂应具备以下特点：①药物迅速在内耳达到理想有效浓度，并维持此浓度适当时间；②在机体其它部位无药物分布或药物浓度仅在最低范围；③一旦治疗目的达到，药物立即从内耳消除；④选择的缓释辅料对机体无毒副作用；⑤可注射性；⑥可实现商品化生产，使用简便，易于推广。 

蛋白基非球微纳材料是一种相当有前途的药物载体，本发明是在以往制备白蛋白微纳米球工艺技术基础上进行改良，优化了制备工艺，即不再进行旋转蒸发法将乙醇挥发出去，而是改用戊二醛交联或高温水浴热变性的固化方法后利用离心和干燥技术制备出两种以上蛋白基花样结构的微纳材料，并加入模型药物制备出具有缓释效果的缓释载药制剂。这样有利于减少材料的细胞毒性使产物更安全，同时还保留了白蛋白表面大量的有用基团，增强其对细胞的营养作用和对细胞增殖的促进作用。另外，本发明将其引入到跨圆窗膜内耳给药领 域，不仅能很好发挥白蛋白自身的营养作用，同时由于其表面结构的特殊性使其更易于吸附携带其他药物而发挥缓释转运作用。因此本发明最大的特点在于制备的蛋白基花样结构微纳材料结构完整，制备方法简单、可重复性良好，极低毒性、有很好的载药、缓释功能。 

发明内容

基于目前国内外尚无对内耳病(如突发性耳聋、梅尼埃病、噪声性耳聋)局部用药的缓释制剂在临床上应用。本发明的目的旨在针对现有技术的缺点，提供一种可在鼓室腔内注射给药、并能跨圆窗膜实现内耳药物转运的缓释载药微球的制备技术和工艺。这样既减少了给药量，增加了内耳局部的药物浓度，同时也大大降低了传统给药方式给患者带来的全身毒副作用。 

本发明所述的可注射蛋白基花样结构载药微纳材料与内耳跨圆窗膜给药缓释制剂及其制备方法如下： 

1)取血清白蛋白溶于一定浓度碳酸盐水溶液中，得到含有血清白蛋白的水溶液； 

2)在一定速度的磁力搅拌下加入无水乙醇溶液，形成乳白色白蛋白混悬液； 

3)放入水浴锅中在高温下进行热变性固化处理，离心、干燥后形成稳定的蛋白基花样结构的微纳材料； 

4)以罗丹明B为模型药物与蛋白基花样结构的微纳材料共混依靠物理吸附形成粉红色复合缓释微球载制剂。