[发明专利]一种灵长类指尖皮肤创口测定出血时间的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生理功能测定领域，涉及出血时间的测定，具体涉及灵长类出血时间的测定方法。

背景技术

出血时间指在一定条件下，人为造成创口后，血液从自然流出到自然停止所需的时间。出血时间的长短是临床上和动物实验中一项常用的指标，用于评估机体的凝血机能、相关疾病、以及抗凝血和抗血栓药物的效果等。在灵长类动物(如人、猴子等)出血时间测定实施中，一般采取用出血时间测定切口器(商业化产品)在上肢手臂皮肤上形成标准切开，从而测量创口出血至凝血的时间。其基本方法是先将实验动物的手臂掌心向上置于固定的台面上，在上臂上段套上血压计袖带，使用袖带充气压力达到40mmHg，并保持此恒定压力30-60秒；以肘窝皮肤皱褶下方2-3厘米，上臂外侧1/3处作为测试部位；使用出血时间测定切口器在该测试部位(避开动、静脉血管)造成微小标准创口，用计时表测定出血到自然凝血的时间。

在实际使用中，出血时间测定切口器方法存在很多不足，例如：时间测定切口器的安放和部位重复性较差，测量步骤繁琐，结果误差较大；在应用于非人灵长类动物的出血时间测定时，还造成创口深度太浅，出血量过少，不利于凝血药/抗凝血药效果的评估。本发明建立了手指尖末端皮肤切开的方法，其操作简单，可用于改善和有效测定灵长类动物的出血时间。

灵长类动物无论是在生理、病理、解剖、以及免疫学功能等各方面都有着很高的相似度，因此，本发明的手指尖末端皮肤创口测定出血时间的方法，不仅可应用于非人灵长类动物，特别是应用于以非人灵长类动物为模型的新药测试等，在人类相关血液常规和疾病的出血时间测试领域中也具有广泛的应用价值。

发明内容

本发明的目的是旨在建立一种灵长类动物出血时间的测定方法。

本发明是通过下述技术方案实现的：

取1只实验猴固定于猴椅上，使其上肢伸出椅外，将实验猴的手臂掌心向下平放于齐平实验猴心脏位置的固定台面上，先将指甲修剪整齐，使用手术刀齐甲垂直切下指尖直径约为5mm的皮肤，按下秒表开始计时直至出血自然停止(出血自然停止时间定义为：血滴滴下间隔30秒后仍无血滴滴下，则前次血滴滴下的时刻为出血自然停止时间)，记录出血时间，用试管收集血滴并称量出血量。

本发明提供的测定出血时间方法，优选的是，实验动物手掌掌心向下平放于齐平其心脏位置的固定台面上。

本发明提供的测定出血时间方法，优选的是，修剪整齐实验动物的指甲。

本发明提供的测定出血时间方法，优选的是，使用手术刀齐甲垂直切下实验动物的指尖皮肤。

本发明提供的测定出血时间方法，可以测定灵长类动物创口出血量。

本发明提供的测定出血时间方法，可以应用于任何一个指尖。

本发明提供的测定出血时间方法，可以多次和反复测试。

本发明提供的测定出血时间方法，可以对灵长类动物凝血功能进行评价。

本发明提供的测定出血时间方法，可以应用于评价任何一种技术、方法、药物、或装置干预凝血功能的效应，如疗效、安全性、及副作用等对凝血功能的效果或影响。

本发明的优点是：

本发明所描述的测定出血时间方法操作简单、重复性高、创口损伤较小、且在短时间内即可恢复，不影响动物的正常机能以及摄食和饮水等日常活动，在评价药物干预凝血因子功能的研究中，本发明所描述的测定出血时间方法可实现实验动物自身对照，避免因个体差异所产生的误差。

附图说明

图1是实验猴指尖皮肤创口的操作示意图

图1中，1手术刀，2实验动物手指，3手掌放置台面。

图2是实施例1比较图

具体实施方式

为了可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，下面结合实施例进一步阐述本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1

10只成年雄性食蟹猴，随机分成两组，一组接受本发明所述的指尖皮肤创口出血时间测定法，一组接受现有的出血时间测定切口器方法，比较两组分别测得的出血时间(以秒为单位)和出血量(以克为单位)。

采用T test数据统计方法来比较两组分别测得的出血时间。

ns：没有统计差异，*p＜0.05，**p＜0.01

出血量测得结果如下：

统计结果显示两种方法测得的出血时间无统计学差异，但实施例1结果表明本发明方法测得的出血时间平均相对较长，数据更加集中，标准误较小，有较高的检测灵敏性，可测量出血量；相比较，现有的出血时间测定切口器方法测得的出血时间平均较短，数据分散程度较大，且实验过程中出血量无法测定。