[发明专利]一种去氧地胆草素的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别涉及一种去氧地胆草素的制备方法。

背景技术

去氧地胆草素，CAS号29307-03-7，分子式C19H20O6，分子量344.3，分子结构式如下：

去氧地胆草素属倍半萜类化合物，无色针状结晶（氯仿），熔点>320℃（198～200℃软化）。来源于菊科植物地胆草（Elephantopus scaber L.）全草,动物实验显示具有显著的抗癌活性。

通过文献检索，现有去氧地胆草素制备方法的公开多采用硅胶柱分离，由于硅胶柱分离存在样品损失大、重现性差，而且污染严重，不是适合工业化。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种去氧地胆草素的制备方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种去氧地胆草素的制备方法，其特征在于：取地胆草原料粉碎，加入5-10倍量60%-90%甲醇溶液超声提取2-3次，提取液加入活性炭回流脱色，滤出活性炭浓缩后加入大孔树脂柱中吸附，用5-10倍柱体积50%-90%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩后用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液回收试剂再用高速逆流色谱仪分离，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥即得。

所述的大孔树脂可选HZ816、HPD100、AB-8和D101中的一种。

所述的高速逆流色谱仪分离条件为：取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按1-3:2-5:5-9:3-5混合，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速700-1000rpm，流速为1-3ml/min。

采用本法制备去氧地胆草素，操作简便，制备量大，而且低污染，适合工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取地胆草粉碎，称2kg，每次用10L70%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液加入200g活性炭回流脱色，滤出活性炭减压浓缩无醇加入HZ816大孔树脂柱中吸附，用7倍柱体积60%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩至300ml，加入乙酸乙酯溶液萃取3次，萃取液回收试剂，得浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按2:3:5:3混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速800rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得去氧地胆草素2.3g，经HPLC检测，含量98.5%，经UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

实施例2：

取地胆草粉碎，称2kg，每次用15L90%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液加入200g活性炭回流脱色，滤出活性炭减压浓缩无醇加入AB-8大孔树脂柱中吸附，用8倍柱体积70%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩至200ml，加入乙酸乙酯溶液萃取3次，萃取液回收试剂，得浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按1:3:7:4混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速850rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得去氧地胆草素2.6g，经HPLC检测，含量97.7%，经UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

实施例3：

取地胆草粉碎，称2kg，每次用10L70%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液加入200g活性炭回流脱色，滤出活性炭减压浓缩无醇加入D101大孔树脂柱中吸附，用5倍柱体积75%甲醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩至200ml，加入乙酸乙酯溶液萃取4次，萃取液回收试剂，得浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按3:5:7:3混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速900rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得去氧地胆草素2.4g，经HPLC检测，含量98.1%，经UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。