[发明专利]利用凝胶渗透色谱处理生物检材的拟除虫菊酯类农药检验方法

权利要求书

1.利用凝胶渗透色谱处理生物检材的拟除虫菊酯类农药检验方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)在含有拟除虫菊酯类农药的生物检材中加入有机溶剂A，离心，分离有机相，将得到的有机相浓缩至干，再用有机溶剂A溶解，过有机微孔滤膜后得提取液；

(2)提取液进凝胶渗透色谱净化柱，用有机溶剂B淋洗，收集淋洗液，在浓缩仪上吹干，用有机溶剂C溶解后得到待测液；凝胶渗透色谱净化柱的填充相为苯乙烯-二乙烯苯共聚物；

(3)利用气相色谱仪对待测液进行检测。

2.根据权利要求1所述的利用凝胶渗透色谱处理生物检材的拟除虫菊酯类农药检验方法，其特征在于，在步骤(1)中，生物检材为血液、尿液或肝组织，拟除虫菊酯类农药为氯氰菊酯、溴氰菊酯、甲氰菊酯、氰戊菊酯和高效氯氟氰菊酯中的一种或多种；有机微孔滤膜的孔径为0.35～0.55μm；在步骤(2)中，有机溶剂B为乙酸乙酯和环己烷的混合溶液，用乙酸乙酯和环己烷的混合溶液进行淋洗；有机溶剂C为色谱纯甲醇。

3.根据权利要求2所述的利用凝胶渗透色谱处理生物检材的拟除虫菊酯类农药检验方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)分别将含有拟除虫菊酯类农药的血液样品、含有拟除虫菊酯类农药的尿液样品和含有拟除虫菊酯类农药的匀浆肝样品加入到离心管中，混匀振荡，放置，向离心管中加入乙酸乙酯和环己烷的混合溶液、乙腈、丙酮和环己烷的混合溶液或异戊醚和环己酮的混合溶液，振荡，离心，分离有机相，再向离心管中加入乙酸乙酯和环己烷的混合溶液、乙腈、丙酮和环己烷的混合溶液、异戊醚和环己酮的混合溶液、环庚烷和丁酸丙酯的混合溶液、环己醇和乙二醇二乙醚的混合溶液，振荡，离心，分离有机相，合并两次获得的有机相，置于浓缩仪上浓缩至干，用乙酸乙酯和环己烷的混合溶液溶解，过有机微孔滤膜，得到提取液；

(2)提取液进凝胶渗透色谱净化柱，用乙酸乙酯和环己烷的混合溶液淋洗，收集淋洗液，在浓缩仪上吹干，色谱纯甲醇溶解后得到待测液；

凝胶色谱条件：凝胶渗透色谱净化柱：300mm×20mm，凝胶渗透色谱净化柱的填充相为苯乙烯-二乙烯苯共聚物，流动相：乙酸乙酯和环己烷的混合溶液，流速：4.7mL/min，进样量：5mL，检测波长为254nm，开始收集时间：8min，结束收集时间：14min，在线浓缩温度和真空度：1区：42℃、30.0KPa，2区：51℃、24.0KPa，3区：52℃、22.0KPa；

(3)利用带电子捕获检测器的气相色谱仪对待测液进行检测，气相色谱条件：30m×0.25mm×0.25μm的DB-1石英毛细管柱，载气为纯度为99.99％的氮气，流量1.0mL/min，柱温200℃保持1min、然后以每分钟10℃升温至280℃、保持15min；进样口温度280℃，分流进样，电子捕获检测器温度300℃；

并利用气相色谱仪-质谱联用仪进行拟除虫菊酯类农药的确证，气相色谱一质谱联用仪条件：30m×0.25mm×0.25μm的DB-5MS毛细管柱，载气为纯度为99.99％的氮气，流量1.0mL/min，柱温80℃保持2min、然后以每分钟30℃升温至280℃、保持15min；传输线温度230℃；进样口温度280℃，分流进样；质谱条件：NCI电离源，电子能量70eV，离子源温度200℃；调谐方式为自动调谐，倍增电压1102V，发射电流100μA；全扫描定性分析，扫描起始时间3min，扫描范围40amu～450amu。

4.根据权利要求3所述的利用凝胶渗透色谱处理生物检材的拟除虫菊酯类农药检验方法，其特征在于，在步骤(1)和步骤(2)中：乙酸乙酯和环己烷的混合溶液中乙酸乙酯和环己烷体积比为1∶1；在步骤(1)中：丙酮和环己烷的混合溶液中丙酮和环己烷体积比为1∶1，异戊醚和环己酮的混合溶液中异戊醚和环己酮体积比为1∶8，环庚烷和丁酸丙酯的混合溶液中环庚烷和丁酸丙酯的体积比为1∶3，环己醇和乙二醇二乙醚的混合溶液中环己醇和乙二醇二乙醚的体积比为2∶7。