[发明专利]棉花细胞质雄性不育恢复系的分子鉴定方法

权利要求书

1.用于鉴定棉花细胞质雄性不育恢复系的分子标记，其特征在于，所述分子标记由核苷酸序列如SEQ ID NO.2和3所示的引物经PCR扩增棉花基因组DNA得到；且

所述分子标记含有一段特异的片段，该特异片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.权利要求1所述的分子标记在鉴定棉花细胞质雄性不育恢复系中的应用。

3.权利要求1所述的分子标记在鉴定棉花恢复系种子纯度中的应用。

4.用于通过PCR扩增权利要求1所述分子标记，从而鉴定棉花细胞质雄性不育恢复系的CAPS标记引物，其特征在于，其为核苷酸序列如SEQ ID NO.2和3所示的引物。

5.权利要求4所述的引物在鉴定棉花细胞质雄性不育恢复系中的应用。

6.权利要求4所述的引物在鉴定棉花恢复系种子纯度中的应用。

7.一种棉花细胞质雄性不育恢复系的分子鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)用权利要求4所述的引物扩增待测棉花样品的基因组DNA，回收扩增产物；

(2)扩增产物经限制性内切酶Dra I酶切后，酶切产物经琼脂糖凝胶电泳检测，若电泳条带出现184bp和124bp两个特异性条带，而没有出现317bp的扩增片段的待测样品为不含恢复基因位点的棉花材料；若电泳条带出现317bp的同时，还出现184bp和124bp两个特异性条带，则待测样品为恢复基因位点杂合的棉花材料；若电泳条带仅有317bp条带，没有出现184bp和124bp这两个特异性条带，则待测样品为恢复基因位点纯合的棉花材料。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，酶切时间为30min。