[发明专利]假单胞菌JY-Q菌株及其用于降解再造烟叶浓缩液中尼古丁的应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物领域，尤其涉及一株新的尼古丁高效降解菌及其用于降解再造烟叶浓缩液中的尼古丁。

背景技术

尼古丁(Nicotine，烟碱)，化学名称为1-甲基-2(3-吡啶基)-吡咯烷，做为天然生物碱在烟草植物中占主要成分，是环境重要污染物之一。一些微生物可以通过不同的代谢途径（如吡啶途径，吡咯途径，脱甲基化途径等）利用尼古丁，其中一些菌株具有应用价值。近年来，利用微生物降解尼古丁已成为国内外研究的热点之一。

再造烟叶浓缩液中的尼古丁含量偏高是目前薄片企业急待解决的实际问题。在造纸法再造烟叶生产工艺中，烟末和烟梗被水提成母液、浓缩成浓缩液后，重新回涂到再造烟叶片基上。而烟末中含有约2-3 %的烟碱，易造成薄片产品的尼古丁含量偏高和不可调控。目前主要靠低烟碱烟梗浓缩液与高烟碱含量的烟末浓缩液的比配来实现，但这种通过物理手段的调配（如增加烟梗母液的参配比例），对薄片品质的负面影响较大。因而需要研究和利用其他技术（如生化技术）来直接处理浓缩液，实现对尼古丁指标的可调可控。 

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明的一个目的是提供一株假单胞菌（Pseudomonas sp.）JY-Q菌株，该菌株是从造纸法再造烟叶生产工艺线的烟末母液中分离筛选得到，并可应用于生产工艺线的浓缩液中尼古丁的生物降解。本发明的二个目的是提供该菌株在降解尼古丁中的应用。本发明的二个目的是提供用于所述的假单胞菌JY-Q菌株的富集培养基，

为了实现上述的第一个目的，本发明采用了以下的技术方案：

假单胞菌（Pseudomonas sp.）JY-Q菌株，该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：中国.武汉.武汉大学，保藏日期：2013年5月28日，保藏编号：CCTCC NO: M 2013236。

为了实现上述的第二个目的，本发明采用了以下的技术方案：上述的假单胞菌JY-Q菌株的应用，该菌株用于尼古丁的降解。

作为优选，该菌株用于再造烟叶浓缩液中尼古丁的降解。作为再优选，所述的再造烟叶浓缩液的pH为6.5-7.0。

为了实现上述的第三个目的，本发明采用了以下的技术方案：

用于所述的假单胞菌JY-Q菌株的富集培养基，其特征在于该培养基包括以下组分构成：Na₂HPO₄ 5.57 g·L^-1, KH₂PO₄ 2.44 g·L^-1,（NH₄）₂SO₄ 1 g·L^-1, MgCl₂·6H₂O 0.2 g·L^-1, MnCl₂·4H₂O 0.0004 g·L^-1, FeCl₃·6H₂O 0.001 g·L^-1, CaCl₂ 0.001 g·L^-1，尼古丁 2 g·L^-1, pH=7.0。

本发明的菌株是从杭州利群环保纸业公司提供的烟末母液中筛选得到，24h可将基本培养基中含量为5 g/L的尼古丁完全降解，在造纸法再造烟叶生产工艺中有广泛的工业化应用前景。

附图说明

图1. 电镜图片Electron micrograph (25000×)。

图2. 基因组电泳图。

图3. 16s rDNA PCR电泳图。

图4. 基于菌株16S rDNA序列构建的系统发育树。

图5. 不同尼古丁浓度对Pseudomonas sp. JY-Q降解影响图。

图6. 不同温度对Pseudomonas sp.JY-Q降解影响图。

图7. 不同pH对Pseudomonas sp.JY-Q降解影响图。

图8. Pseudomonas sp.JY-Q在5%浓缩液中降解应用图。

微生物保藏声明

假单胞菌（Pseudomonas sp.）JY-Q菌株，该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：中国.武汉.武汉大学，保藏日期：2013年5月28日，保藏编号：CCTCC NO: M 2013236。