[发明专利]一种大豆中多种农药残留的通用快速检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种农药残留检测方法，尤其是涉及一种大豆中多种农药残留的通用快速检测方法。

背景技术

农业生产中广泛使用农药以提高产量，但农药残留的危害也日趋严重。发达国家相继建立了蔬菜中农药的最低浓度限定标准，如欧洲指南91/414/EEC、美国食品质量保护法案(FQPA)]和有世界上最严格食品限量标准的日本肯定列表制度等。我国从20世纪90年代初开始农药多残留分析方法的研究，并相继推出了一系列国家标准分析方法，农药多残留检测技术在我国得到了快速发展。

目前，针对多组分农药残留的分析，主要采用振荡均质、超临界萃取、加速溶剂萃取(ASE)等技术进行样品提取，采用凝胶渗透色谱(GPC)、固相萃取(SPE)等技术进行样品净化，采用气相色谱(GC)或液相色谱(LC)及其与质谱(MS)联用等技术进行分离测定。由于GC或LC受检测器的限制，定性准确性相对较差。随着质谱检测器的普及，GC-MS得到了广泛的应用，现有的测定大豆多农药残留的国家标准如GB/T19649-2006粮谷中475种农药及相关化学品残留量的测定，公开了采用气相色谱-质谱法对水果和蔬菜中农药残留进行检测，但受限于单级质谱自身灵敏度不足、抗干扰能力较差等原因，检出限(LOQ)一般在50-100ug/kg之间，难以满足欧盟、日本等日益苛刻的农药残留检测要求，尤其是日本肯定列表制度中的一律标准要求（10mg/kg）。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种简便、快速、背景干扰低、选择性好、灵敏度高的大豆中多种农药残留的通用快速检测方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种大豆中多种农药残留的通用快速检测方法，具体包括以下步骤：

（1）样品前处理

A.提取

将大豆样品充分打碎混合均匀作为试样，称取5.00g试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，在离心管中加入9mL水，涡旋振荡浸湿后，静置10min，在离心管中加入20mL乙腈，用高速组织捣碎仪在15000r/min下匀浆提取1min，然后在离心管中加入1g氯化钠、1g柠檬酸三钠二水合物、0.5g柠檬酸氢二钠盐1.5水合物、4g无水硫酸镁后振荡1min，在4000rpm离心6min后取样品上清液备用；

B.净化

用5mL乙腈活化C₁₈固相萃取柱后，取10mL样品上清液过C₁₈固相萃取柱，萃取液接收于鸡心瓶中，用3mL乙腈洗脱C₁₈固相萃取柱，将洗脱液合并于鸡心瓶中，将鸡心瓶置于40℃水浴中旋转浓缩得到0.5-1.5mL浓缩液，在Carbon/NH₂固相萃取柱中加入0.5-1.5cm高的无水硫酸钠，用10mL乙腈/甲苯混合液活化Carbon/NH₂固相萃取柱后，将浓缩液过Carbon/NH₂固相萃取柱，并用25mL乙腈/甲苯混合液洗脱，收集于鸡心瓶中，将鸡心瓶于40℃水浴中减压蒸发至近干后用氮气吹干，用1mL丙酮/正己烷混合液溶解定容至1mL得到样品提取液备用；

（2）混合标准溶液组成和基质标准曲线制备

A．混合标准溶液组成：混合标准工作溶液中306种农药的浓度均为1.0μg/ml，具体农药见表1所示；

B．基质标准曲线定量：吸取一定量的混合标准溶液于5mL容量瓶，用按体积比1：1混合而成的丙酮/正己烷混合液定容至刻度，配制成各农药浓度均为20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL，200ng/mL的四种混合标准溶液，取空白大豆样品按步骤（1）处理，在吹干待定容的空白大豆样品提取物中分别加入上述各浓度的混合标准溶液1mL，配制成浓度相应为20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和200ng/mL的样品基质添加混合标准溶液，以浓度为横坐标，仪器响应值为纵坐标，做基质加标标准曲线，作为试样处理液中待测物浓度定量的依据；

（3）气相色谱-三重四极杆串联质谱联用测定

色谱柱：HP-5MS，30m×0.25mm,0.25μm；

色谱柱温度程序：50℃保持1min，以20℃/min升温至150℃，再以3℃/min升温至230℃，再以10℃/min升温至300℃，保持10min；

载气：高纯氦气，纯度大于99.999%，流速1.2mL/min；

进样口温度：250℃；

进样量：1μL；