[发明专利]一种口蹄疫抗体水平检测试纸及制备方法无效
申请号: | 201310317715.5 | 申请日: | 2013-07-25 |
公开(公告)号: | CN103344757A | 公开(公告)日: | 2013-10-09 |
发明(设计)人: | 孙波;唐道祝 | 申请(专利权)人: | 孙波 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/558;G01N33/531 |
代理公司: | 北京市中闻律师事务所 11388 | 代理人: | 王新发 |
地址: | 222200 江苏省连云港市灌*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 口蹄疫 抗体 水平 检测 试纸 制备 方法 | ||
1.一种口蹄疫抗体水平检测试纸,其特征在于,包括震荡器、检测盒和设置于所述检测盒内的口蹄疫抗体水平检测试纸;所述口蹄疫抗体水平检测试纸的检测区包括设置在基板上的吸收垫,所述吸收垫由多孔纤维制成;在所述吸收垫的一端依次设有免疫金标层、硝酸纤维膜、吸收层;所述检测盒底部侧壁上设有试纸入口,所述试纸入口的形状与所述口蹄疫抗体水平检测试纸相适配以使所述口蹄疫抗体水平检测试纸从所述试纸入口插入所述检测盒内;所述口蹄疫抗体水平检测试纸上设有检测区;所述震荡器顶部设有检测液输入口,底部设有检测液出口,且所述检测液出口设有可开合的活门;所述震荡器的检测液出口与检测盒顶部的开口导通,所述检测盒顶部的开口的位置与所述口蹄疫抗体水平检测试纸的检测区的位置相适配。
2.根据权利要求1所述的口蹄疫抗体水平检测试纸,其特征在于,所述硝酸纤维膜上设有用抗O型口蹄疫病毒的兔或豚鼠IgG抗体形成的质控线,硝酸纤维膜上处于质控线的上游包被有O型口蹄疫病毒形成的检测线,硝酸纤维膜的检测线和免疫金标层吸附的胶体金标记的O型口蹄疫病毒是天然病毒,或者是基因重组表达口蹄疫病毒,或者是口蹄疫病毒的分解抗原。
3.一种如权利要求1或2所述的口蹄疫抗体水平检测试纸的制备方法,包括:
步骤1、15~50纳米的胶体金溶液
步骤2、先将胶体金溶液的pH值调至8.0~8.4,再在其中按每100ml胶体金溶液加入0.1~0.4mg口蹄疫病毒,搅拌均匀后,再在溶液中按0.2~1g/100ml加入动物血清蛋白,4℃静置2~4小时,再将上述胶体金溶液离心去除沉淀物,得上清液,将上清液再经离心处理得沉淀物,所得沉淀物按4~10ml/100ml溶于含重量比0.2~0.6%的动物血清蛋白和0.01~0.06%叠氮钠的0.02M pH7.4 Tris-Hcl的缓冲液中得到胶体金标记的病毒溶液,将胶体金溶液浸入玻璃纤维至液体开始渗出为止,形成金标抗体层,将金标抗体层进行干燥处理;
步骤3、在硝酸纤维素膜中段喷检测线,再取兔抗或鼠抗O型口蹄疫IgG调浓度为1.5~2.5mg/ml,,用喷膜机在纤维素膜中段,距检测线0.5~1cm处,喷质控线,喷膜量按10~15ul/1cm设置,然后干燥处理,再用0.01m PH7.0含小牛血清的磷酸缓冲液在37℃下封闭30分钟,0.01ml pH7.0的PBS漂洗后再次进行干燥处理得到硝酸纤维素膜;
步骤3、依次将金标抗体层、检测段及吸收垫材料和吸收段固定在采用不透水材料制成的基板上。
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