[发明专利]一种刺氟合剂的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明公开了一种治疗大肠癌耐药的药物（刺氟合剂）及其制备方法。

背景技术

大肠癌包括结肠癌和直肠癌（carcinoma of the colon and rectum），是严重威胁人类生命健康最主要的消化道肿瘤之一。据国际癌症研究机构（IARC）公布的数据表明，每年全球新发大肠癌病例约78.3万，在最常见恶性肿瘤中排第3位，其导致死亡的患者占所有恶性肿瘤死亡人数的10%。随着我国社会经济的迅速发展，人民膳食结构和生活水平发生了较大的转变，我国大肠癌的发病率也逐年上升，目前已高居第4位，接近发达国家水平。更令人担忧的是，与欧美发达国家相比，我国大肠癌患者的发病年龄明显提前，呈年轻化趋势，30岁以下青年期大肠癌患者占10%左右，中位发病年龄约为45岁，较欧美等国提前12-18年。

根治性手术是临床治疗大肠癌的首选方法。但绝大多数患者由于缺乏特异性临床症状，确诊时已经处于中晚期，失去了根治性手术最佳时机，单纯手术治疗已不能彻底清除病灶。因此，作为唯一一种全身性的整体治疗手段，化疗在中晚期大肠癌患者综合治疗中占有非常重要的地位。过去的几十年来，随着新的化疗药物不断涌现，大肠癌的化疗方案也经历了较大的发展，但自从1957年由Duschinsky等合成以来，5-氟尿嘧啶（5-fluorouracid，5-FU）在多种恶性肿瘤(尤其是消化道肿瘤)的治疗中扮演着重要角色，是公认的治疗大肠癌的一线药物。目前，5-FU及其衍生物为主的化疗方案仍是大肠癌辅助化疗的基础。

大肠癌细胞对化疗药物产生耐药，尤其是多药耐药（Multidrug Resistance，MDR），是导致化疗失败的最主要原因之一，这极大地降低了医患双方对化疗有可能为患者带来短期或长期收益的期待，而与之俱来的毒副反应也因此更令患者难以接受。因此，如何克服大肠癌细胞的化疗耐药，尤其是对以5-FU为代表的化疗药物的耐药性，寻找高效低毒的逆转剂，已成为临床肿瘤治疗中亟待解决的关键课题。

肿瘤细胞耐药性的产生是多种因素综合作用的结果，目前公认的经典分子机制包括细胞膜蛋白异常、酶表达异常、凋亡通路异常、DNA损伤修复机制异常等，针对上述MDR形成的不同耐药机制，人们已经开展了一系列克服耐药的实验研究和临床试验。P-糖蛋白 (P-glycoprotein，P-gp)是具有药泵功能的跨膜转运蛋白，是介导MDR的关键蛋白之一。P-gp与药物的特异性结合激活了药泵蛋白的ATP酶活性，引起蛋白构象改变，通过ATP水解功能，逆浓度梯度将细胞内的抗肿瘤药物转运至细胞外，从而降低胞内药物浓度，产生细胞耐药。多年来，筛选应用能抑制P-gp表达的MDR调节剂是逆转耐药实验最主要的研究方向。MDR调节剂通过与化学药物竞争性地同P-gp结合，增加化疗药物在肿瘤细胞内的积累浓度，进而恢复肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。然而大多数化学逆转剂由于致命毒副反应而仅仅停留于实验阶段，尚不能用于临床。维拉帕米、环孢素A（cyclosporine A，CSA）等作为仅有的几个应用于临床试验的化学致敏剂，也因其所致低血压、心律不齐、免疫功能抑制等严重不良反应，临床应用极为受限。

因此，许多国内外学者开始将目光转向中医药。中医药资源丰富，并以其多靶点、多层次、多环节、整体调节的特性，在肿瘤治疗中发挥着越来越重要的作用，成为抗肿瘤药物筛选的热点领域。

刺芒柄花素（Formononetin）是豆科多年生草本植物红车轴草（Trifolium Pratense L.）的主要异黄酮成分之一，被视作典型的植物雌激素。红车轴草作为一种天然保健食品，其销量在美国一直名列植物药的前10位。在学者对红车轴草所含各类异黄酮成分的研究中，大豆异黄酮和染料木素的研究较多，而对其中含量很高的刺芒柄花素研究甚少。且刺芒柄花素目前已经可以通过化学方法人工合成，成本低廉。

到目前为止，尚未有刺氟合剂应用于治疗大肠癌耐药的研究报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗效果显著，原料成本低廉，制备方法简单的用于大肠癌耐药治疗的刺氟合剂及制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明通过下述技术方案得以解决：

一种刺氟合剂的制备方法，其特征在于，方法如下：

步骤a： RPMI-1640培养基中加入胎牛血清，100U/ml青霉素，100μg/ml链霉素，充分混匀后，离心管分装，4℃保存备用，即得RPMI-1640完全培养液；