[发明专利]替米考星、磺胺二甲嘧啶复方制剂有关物质的检测方法

权利要求书

1.一种替米考星、磺胺二甲嘧啶复方制剂有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法测定，其特征在于采用的流动相为：乙腈为流动相A；水-磷酸二丁胺溶液为流动相B； 10%甲醇溶液为流动相C。

2.根据权利要求1 所述的一种替米考星、磺胺二甲嘧啶复方制剂有关物质的检测方法，其特征在于流动相的梯度洗脱程序。

3.根据权利要求1、2任一所述的一种替米考星、磺胺二甲嘧啶复方制剂有关物质的检测方法，其特征在于流动相梯度洗脱程序为：

4.根据权利要求1至3任一所述的一种替米考星、磺胺二甲嘧啶复方制剂有关物质的检测方法，其特征在于具体实施步骤如下：

（1）取替米考星、磺胺二甲嘧啶复方制剂适量，加提取液制成每1mL含替米考星4mg的溶液，作为供试品溶液；取替米考星对照品适量，精密称定，加提取液制成每1mL中含0.25mg的溶液，精密量取5mL，置25mL量瓶中，用提取液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；    

（2）用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，选择250mm×4.6mm分析柱；以乙腈为流动相A；水-磷酸二丁胺溶液〔取二丁胺16.8mL，加磷酸溶液（1→10）70mL，边加边搅拌，放冷后，用磷酸调节pH值至2.5±0.1，加水至100mL，即得〕（975：25）为流动相B，10%甲醇溶液为流动相C，流速为1.1mL/min，检测波长为280nm，替米考星反式异构体（两个不完全分开的峰）的相对保留时间为0.9，替米考星顺式异构体的相对保留时间为1.0，替米考星顺式-8-差向异构体的相对保留时间为1.1，理论板数按替米考星顺式峰计算应不低于3000，替米考星的顺式和反式异构体峰之间的分离度应符合要求；

（3）精密量取对照品溶液和供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液的色谱图中（除顺式、反式和顺-8-差向异构体外）如有杂质峰，按下式以无水物计算，单个杂质不得过3.0％，各杂质的和不得过10.0％，供试品溶液色谱图中任何小于对照品溶液顺式异构体峰面积0.01倍的峰可忽略不计：

A×Ws×PAs×W×n]]>

式中 A：供试品溶液色谱图中除了顺式替米考星、反式替米考星、顺-8-差向异构体替米考星和磺胺二甲嘧啶钠外，有关物质峰面积的和或单个有关物质峰面积；

As：对照品溶液色谱图中顺式、反式、顺-8-差向异构体、磺胺二甲嘧啶钠峰面积

的和；

Ws：对照品的重量；

W：供试品的重量；

P：对照品的顺式和反式异构体的含量；

N：对照品与供试品的稀释倍数比。

5.根据权利要求4所述的一种替米考星、磺胺二甲嘧啶复方制剂有关物质的检测方法，其特征是，提取液的配制方法为：取乙腈400-600ml和pH5.0-8.0的磷酸盐缓冲液25mL加入适量水中，用水稀释至1000 mL。

6.根据权利要求1至5任一所述的一种替米考星、磺胺二甲嘧啶复方制剂有关物质的检测方法，其特征是替米考星、磺胺二甲嘧啶复方制剂所用原料为：替米考星、磺胺二甲嘧啶或磺胺二甲嘧啶钠，所用辅料包括但不限于磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、DL-酒石酸、柠檬酸、DL-苹果酸、聚乙二醇6000、无水葡萄糖、环糊精中的一种或多种。