[发明专利]凝结芽孢杆菌的培养基、培养方法及其在发酵床中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及养殖技术领域，具体涉及一种培养凝结芽孢杆菌的培养基、培养方法、以及该凝结芽孢杆菌在发酵床、特别是养鸡发酵床中的应用。

背景技术

发酵床是利用全新的自然农业理念，结合现代微生物发酵处理技术提出的一种环保、安全、有效的生态养猪法。实现养殖无排放、无污染、无臭气、彻底解决规模养殖场的环境污染问题，它是集养殖学、营养学、环境卫生学、生物学、土壤肥料学于一体，遵循低成本、高产出、无污染的原则建立起的一套良性循环的生态养殖体系。它是工厂规模化养殖发展到一定阶段而形成的又一亮点，是养殖业可持续发展的新模式。

微生物发酵床养殖体系中，垫料发酵水平的控制是垫料管理的核心，如何使猪的排泄物与垫料的处理能力达到平衡对发酵床养殖非常关键。由于地区和操作过程的差异，有些养殖垫料的发酵效果并不理想，存在发霉、发酸、不发酵的现象，直接导致发酵的失败，造成人力、物力的大量浪费，甚至会造成猪只的中毒现象。许多学者在发酵床气味控制、培养基调控、营养元素分解进行了大量的研究。Groenestein等^[37]在混合肥料和锯屑的微生物发酵过程中，每周测定发酵床温度、湿度、pH值、尿素、氨气、亚硝酸盐、氟化物、氧化还原电位数、可溶性和不溶性蛋白质和锯屑颗粒大小的变化，发现垫料发酵水平直接影响着发酵床的猪粪降解、臭气分解、物质转化、病原菌防控。Chan等^[12]研究发现要使垫料发酵成功，其湿度必须维持在50%左右，具有较高的pH值和较低的尿素、氨气和亚硝酸盐，但是不溶性蛋白质和硫酸盐含量较高，从而可知管理得当的发酵床垫料有利于控制恶臭气体的产生。Tiquia等 ^[9]研究发现发酵不成功的垫料循环回收利用于农业土壤中，会产生危害植物的毒性物质影响种子发芽、农作物的生长。Tam等^[4]研究发现使用时间较久的养猪发酵床垫料含有高浓度的有机碳和营养素，其传导率、Cu、Zn的含量也更高。 

目前，不少学者对微生物发酵床养猪中发酵床的微生物进行了研究，张庆宁等从生态养猪模式的发酵床中分离纯化到14株优势好氧细菌，这些菌株在猪粪和垫料组成的发酵床生长优势强，耐发酵高热，能产生多种与猪粪降解相关的酶类，除臭效果明显，对某些病原菌具有抑制作用，对猪安全并有促进生长的功能。刘让等^[39]通过实验室和野外采集样本，分别获得1株地衣芽孢杆菌、3株蜡样芽孢杆菌、1株短小芽孢杆菌、1株乳酸杆菌，研究得到这6株菌对大肠杆菌、葡萄球菌均有不同程度的抑制作用，且动物试验安全，为生态养猪提供了发酵菌种。

现有技术中一般采用枯草芽孢杆菌作为发酵床的菌种，枯草芽孢杆菌菌种培养工艺麻烦、效率较低，菌种对粪便中的恶臭、氨气分解不彻底，导致发酵床使用过程中，臭味氨味较大；生长温度偏低，容易导致蚊虫滋生；菌种活性低等缺点。

发明内容

本发明旨在一定程度上解决上述问题。

本发明的第一发明目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种凝结芽孢杆菌培养基。

本发明第二发明目的在于提供一种凝结芽孢杆菌的培养方法。

本发明的第三发明目的在于提供一种凝结芽孢杆菌在发酵床中的应用。

本发明的第四发明目的在于提供一种凝结芽孢杆菌制备的发酵床的应用。

为实现本发明的第一发明目的，本发明采用如下技术方案，一种凝结芽孢杆菌的培养基，所述培养基由以下组分组成：玉米淀粉 1-15g；麸皮 1-20g；玉米浆 5-25g；(NH₄)₂SO₄ 1-2.5g；Na₂HPO₄ 0.5-2g； MgSO₄ 0.5-3g； CaCO₃  0.1-1g。

为实现本发明的第二发明目的，本发明采用如下技术方案，将上述各组分充分混合后高压灭菌15分钟溶于水， pH值控制在 6.5-8.0；将凝结芽孢杆菌接种于培养基中培养18——30小时即可。

为实现本发明的第三发明目的，本发明采用如下技术方案，上述方法培养的凝结芽孢杆菌在发酵床中的应用。

具体地，一种应用上述方法培养的凝结芽孢杆菌制备养鸡发酵床的方法，包括以下步骤：

S1. 按每平方发酵床使用50-100克菌种的使用量，将菌种与水按质量比1：10稀释活化；

S2. 将谷壳平铺，厚度为8-15公分；

S3. 将锯末平摊在谷壳上面，厚度为12-20公分；