[发明专利]一种检测枸杞酸含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药，具体涉及中药枸杞中有效成分含量的检测方法，尤其涉及一种有效成分枸杞酸含量的检测方法。

背景技术

枸杞是一种灌木果实，其学名为（Ｌｙｃｉｕｍ ｂａｒｂａｒ ｕｍ Ｌ．）目前已成为家喻户晓的对健康有益的食品，近年来大量进入美洲和欧洲市场，被看成是一种具有很强生命力的补益食品。近代世界对枸杞的研究显示，其果实内含有大量对人体有益的天然营养素。枸杞浑身是宝，人体所需要的必要营养素它都充分拥有。比如：碳水化合物如：多糖、低聚糖、单糖、食物纤维；抗氧化物质如：抗坏血酸、类胡萝卜素、牛磺酸、黄酮类化合物、谷胱甘肽、枸杞酸；还有其它多种人体必需的氨基酸以及甾体化合物、生物碱等。还经过加工开发了多种枸杞的保健食品，但是，对于枸杞及其加工产品中所有的枸杞酸含量缺乏有效、科学的检测方法。因此，研究检测枸杞酸含量的方法，具有积极意义。

发明内容

本发明提供了一种检测枸杞酸含量的方法。

本发明采用HPLC（高效液相色谱）方法检测枸杞或枸杞提取物中枸杞酸的含量。

本发明方法包括下列步骤：

（1）色谱分析条件：二元醇基键合色谱柱(4.6×150mm，粒径5μm)，SPD-10AV紫外可见检测器，CTO-6A柱温箱，SIL-10AD自动进样器，DGU-14A排气器，LC-10AD泵；进样量10μl，自动进样；流动相为乙腈-66.7mM醋酸铵（85/15,v/v），等梯度洗脱；流速为0.7ml/min；柱温为40℃；检测波长为260nm；

（2）供试品溶液的制备

精密称取枸杞提取物0.5g于100ml锥形瓶中，加30ml水溶解，在温度80～90℃助溶15min，温度25℃超声15min，冷却至室温，转移至50ml容量瓶中，并用水定容，从中吸取4ml溶液于25ml容量瓶中，用乙腈定容即可，分析时，供试品溶液过0.45μm有机系微孔滤膜，取续滤液进样；或

精密称取0.3g枸杞子，加1ml水置于温度0～4℃溶胀1h，研碎，加15ml乙腈-水（3:7）混匀，在温度25～30℃超声15min，冷却至室温，离心（800×g）20min，上清液转移至100ml容量瓶中，沉淀部分用10ml乙腈-水（3:7）按上述条件进行第二次提取，离心后将两次上清液合并于100ml容量瓶，用乙腈定容即可，分析时，供试品溶液过0.45μm有机系微孔滤膜，取续滤液进样；

（3）对照品溶液的制备  精密称取在减压干燥器干燥12小时的枸杞酸对照品7.78mg于100ml容量瓶中，加1ml水溶解并用流动相稀释至刻度，配成77.80μg/ml的枸杞酸对照品贮备溶液；

（4）枸杞酸的检测限和定量限浓度分别为2.5×10^-2与8.2×10^-2μg/ml

（5）在上述条件下，通过HPLC检测。

本发明方法所述步骤（2）供试品溶液的制备用低级醇或乙腈。所述低级醇选自C₁、C₂或者C₃的伯醇或者仲醇，它们可以是一元醇也可以是二元醇。

本发明的检测方法科学有效，可应用于枸杞原药材和采用枸杞为原料进行深加工后所得枸杞提取物中枸杞酸含量的检测，能很好地对产品质量进行控制，并具有鉴别别产品真伪的效果，有较大的实际应用价值和积极的社会效益。

附图说明

图1实施例1枸杞样品前处理后的HPLC图谱

图2实施例2枸杞多糖提取物样品前处理后的HPLC图谱

图3实施例4枸杞低聚糖提取物样品前处理后的HPLC图谱

图4实施例6枸杞酸浓度和峰面积的线性关系

纵坐标：峰面积；横坐标：枸杞酸浓度μg/ml

具体实施方式

实施例1

精密称取0.3g枸杞子（市售，280粒/50g），加1ml水置于温度0～4℃溶胀1h，磨碎，加15ml乙腈-水（3:7）混匀，在温度25～30℃超声15min，冷却至室温，离心（800×g）20min，上清液转移至100ml容量瓶中。沉淀部分用10ml乙腈-水（3:7）按上述条件进行二次提取，离心后将两次上清液合并于100ml容量瓶，用乙腈定容即可。分析时，供试品溶液过0.45μm有机系微孔滤膜。滤液进样后（采用HPLC检测，仪器型号：Agilent1100）

测得枸杞子中枸杞酸含量为1.34%。

实施例2