[发明专利]一种保持高细胞活率的神经干细胞的培养方法有效
申请号: | 201310231454.5 | 申请日: | 2013-06-09 |
公开(公告)号: | CN103305466A | 公开(公告)日: | 2013-09-18 |
发明(设计)人: | 聂德志;贲亮;宛莹 | 申请(专利权)人: | 吉林省拓华生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0797 | 分类号: | C12N5/0797 |
代理公司: | 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 | 代理人: | 程伟 |
地址: | 136000 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 保持 细胞 神经 干细胞 培养 方法 | ||
1.一种神经干细胞的培养方法,其包括步骤:
1)提供神经干细胞;
2)对神经干细胞进行悬浮培养,然后将经过悬浮培养的神经干细胞进行贴壁培养;
3)重复1次或多次步骤2);
4)收获神经干细胞。
2.如权利要求1所述的神经干细胞的培养方法,其中在步骤2)中:当神经干细胞在悬浮培养中传代一次时,即可进行悬浮培养至贴壁培养的转换。
3.如权利要求2所述的神经干细胞的培养方法,其中在步骤2)中:当神经干细胞在悬浮培养中传代一次且状态良好时,即可进行悬浮培养至贴壁培养的转换;
其中所述状态良好是指神经球大小均匀、神经干细胞在显微镜视野下发亮、且细胞活率不低于95%。
4.如权利要求1所述的神经干细胞的培养方法,其中:
当贴壁培养的神经干细胞达到70%-80%融合时,即可进行贴壁培养至悬浮培养的转换。
5.如权利要求4所述的神经干细胞的培养方法,其中:
当贴壁培养的神经干细胞达到80%融合时,即可进行贴壁培养至悬浮培养的转换。
6.如权利要求1所述的神经干细胞的培养方法,其中所述神经干细胞为哺乳动物神经干细胞。
7.如权利要求1所述的神经干细胞的培养方法,其中所述神经干细胞为人神经干细胞。
8.如权利要求1所述的神经干细胞的培养方法,其中所述悬浮培养或贴壁培养是在无血清DMEM/F12培养基中进行的。
9.如权利要求8所述的神经干细胞的培养方法,其中所述无血清DMEM/F12培养基的酸碱度范围是PH7.0—PH7.2。
10.如权利要求8所述的神经干细胞的培养方法,其中所述无血清DMEM/F12培养基的酸碱度是PH7.0。
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