[发明专利]分离纯化白藜芦醇用的大孔吸附树脂的修饰方法

说明书

技术领域

本发明属于吸附树脂制备技术领域，具体涉及从虎杖中分离纯化白藜芦醇用的吸附树脂的制备方法。

背景技术

虎杖为蓼科多年生草本植物虎杖的根茎，资源丰富。虎杖中含有活性物质白藜芦醇，且含量较高。白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂，能降低血液粘稠度，抑制血小板凝结和血管舒张，保持血液畅通，能预防癌症的发生及发展，具有抗动脉粥样硬化和冠心病，缺血性心脏病，高血脂的防治作用，还具有抑制肿瘤和雌激素样作用，可用于治疗乳腺癌等疾病。如何从虎杖中高效简便地分离纯化出白藜芦醇，除去无效成分，提高白藜芦醇的药用价值，是一个很重要的研究课题。

虎杖的化学成分极为复杂，从复杂的混合物中提取对人体有效的单一中药活性成分白藜芦醇，需灵活综合地利用各种层析技术。层析技术因具有重复性好，可在线检测，纯度高，易于产业化，易于实现生产自动化等特点，被广泛用于从虎杖中高效简便地分离纯化白藜芦醇，是提高白藜芦醇的药用价值的有效方法。

现有从虎杖中分离纯化白藜芦醇用的层析柱，如2010年8月4日公布的公布号为CN101792373A的“一种高纯度白藜芦醇提取分离纯化工艺”专利，公开的工艺为：将虎杖原料粉碎后，经发酵酶解、有机混合溶剂提取、浓缩、醇沉、水沉、过滤、醇溶、柱层析、结晶、纯化，并通过反复的柱层析和多次重结晶得98％白藜芦醇产品，工艺繁琐，其中柱层析的填充材料为氧化铝或硅胶。该层析柱的主要缺点是：①氧化铝的重复利用率低，不利于工业化生产；硅胶则不能被重复利用，工业化生产中造成大量浪费，另外硅胶也存在死吸附，不利于充分纯化虎杖中的活性成分；②氧化铝或硅胶对白藜芦醇的分离效果不高，通常会被反复多次柱层析，才能达到所要的纯度，从而使纯化工艺复杂，生产周期长；③氧化铝和硅胶的预处理工序复杂，增加了工业化生产的难度。又如2010年4月28日公布的公布号为CN101695634A的“从虎杖中提取分离白藜芦醇的方法”专利中，公开的柱层析的填料为聚丙烯酸树脂CG71、聚丙烯酸树脂RPC40、聚苯乙烯树脂CG161、聚苯乙烯树脂CG300、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20中的一种。该柱层析填料的主要缺点是对白藜芦醇的吸附性差，大多数树脂只对某类中药成分才有效，从而使其对白藜芦醇的吸附率不高。

发明内容

本发明的目的是针对现有从虎杖中分离纯化白藜芦醇用的层析柱的不足，提供一种分离纯化白藜芦醇用的大孔吸附树脂的修饰方法，具有白藜芦醇的富集纯化效果好，生产工艺简单，安全且成本低廉，易于实现工业化生产等特点。

实现本发明目的之技术方案是一种分离纯化白藜芦醇用的大孔吸附树脂的修饰方法，以NKA-II树脂为原料，经过原料预处理和氯甲基化反应及接枝苯胺的简单工艺而得产品。所述方法的具体步骤如下：

(1)NKA-II树脂的预处理

①醇洗和水洗

以市售的NKA-II树脂为原料，按NKA-II树脂的质量(g)：无水乙醇的体积(mL)之比为1∶3～5的比例，将NKA-II树脂放置于无水乙醇中浸泡22～26h，使NKA-II树脂浸泡发胀。再利用常规的乙醇湿法填装法将浸泡后的NKA-II树脂填装于层析柱中后，先用无水乙醇以1～3BV/h的速度冲洗填装有NKA-II树脂的层析柱。对NKA-II树脂进行醇洗，用以除去NKA-II树脂在合成中残留的有机溶剂和聚合反应残留的单体杂质，并对醇洗后的流出液进行检测(即在检测的流出液中加入4倍的蒸馏水，当呈白色浑浊液时，表明流出液中有杂质；当不呈白色浑浊液时，表明流出液中无杂质)，直至醇洗流出液中无杂质为止。后用蒸馏水以1～3BV/h的流速冲洗醇洗后的填装有NKA-II树脂的层析柱，并对水洗后的流出液进行检测，用以除去NKA-II树脂中的乙醇，直至水洗流出液中无乙醇为止。

②酸洗和碱洗