[发明专利]一株唾液乳杆菌菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株唾液乳杆菌菌株，还涉及该唾液乳杆菌菌株在制备促进动物生长的药物中的应用，属于微生物领域。

背景技术

唾液乳酸杆菌（Lactobacillus salvarius）是乳杆菌属的重要成员之一，大多数为动物体表和内部黏膜表面的益生菌之一。益生性乳杆菌（LAB）是人和动物肠道、呼吸道、生殖道及皮肤黏膜系统的正常菌群，许多研究成果发现乳杆菌和肠黏膜共同组成保护屏障，防止病毒、细菌等的侵入，人类越来越清晰地认识到益生菌对人类和动物生命健康的重要作用，大量现代免疫学研究结果已经证实益生菌（尤其是乳杆菌）对动物细胞免疫、体液免疫及肠黏膜局部免疫的调节功能，以及对免疫系统发育和免疫稳态的决定作用；并具有抑制肿瘤和抗癌作用等，使益生乳杆菌近年来一度成为现代功能食品、动物饲料添加剂、医学领域的研究热点之一，甚至成为现代固有免疫学领域的研究热点。

一系列研究表明，如果没有益生菌，人和动物的免疫系统绝不能发育成为正常的免疫系统。益生乳杆菌不仅可以有效调节黏膜免疫系统、有效促进分泌型sIgA的分泌，而且还可以调节黏膜的菌群分布，促使某些病原体发生凝聚，并阻止其粘附在黏膜上，以防止其进一步的侵入，并且益生菌吸附在黏膜表面（包括肠黏膜和呼吸道黏膜），能够降解粘性蛋白并利用这种内源性的营养可以基本保持数量稳定，这种粘附可以与黏膜免疫系统发生作用，可以有效地刺激黏膜免疫系统，起到免疫调节作用，从而使黏膜免疫系统处于合适的稳定的激活状态（免疫稳态），进而有利于抵御外来病毒或细菌的入侵。因此乳杆菌的合理存在和适当刺激，可以提高黏膜免疫系统的防御功能，从而有效的阻止病毒的吸附和侵入。

存在于胃肠道黏膜、口腔呼吸道黏膜及生殖道表面的益生菌作为一种活的常驻菌体对肠道黏膜及呼吸道黏膜具有双重的保护作用，一方面它可以在黏膜表面内附着定植，维护胃肠道及呼吸道黏膜微生物菌群平衡；另一方面益生菌可直接与宿主的免疫系统尤其是宿主的黏膜免疫系统发生相互作用诱发黏膜免疫；并能够刺激脾脏、胸腺及法氏囊等免疫中枢器官的发育，还可以促进巨噬细胞发挥佐剂作用；通过影响黏膜系统细胞因子等的合成和分泌，从而增强T、B细胞对抗原刺激的反应性能，有效增强特异性免疫作用；黏膜表面常驻益生菌可以活化黏膜内的相关淋巴组织，增加sIgA生物合成，提高消化道黏膜及呼吸道黏膜免疫功能，通过诱导淋巴细胞和巨噬细胞产生细胞因子，发挥免疫调节作用，从而增强机体免疫功能。但是，目前乳杆菌最大的缺点是生命力十分脆弱，无法久存。研究发现，乳杆菌必须在肠道特定部位才能产生功效。而天然乳杆菌不耐高温、胃酸及胆盐的侵蚀，经饲料制粒后大多数乳杆菌会死亡，很难通过胃环境安全到达肠道发挥作用。

发明内容

针对现有技术中的不足，本发明提供了一种唾液乳杆菌，具有耐酸、耐胆盐的特性。

本发明通过以下技术方案实现的：

本发明菌株分离自中国新疆天山山脉中段，人迹罕至、植被茂密的地表腐殖土层，经MRS接种培养、分离纯化后获得一株唾液乳杆菌菌株（菌株号为HVRIC5），其微生物保藏号为CGMCC No.6787；保藏日期：2012年11月7日；其分类命名为：乳杆菌属唾液乳酸杆菌（Lactobacillus salvarius）；保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所。

本发明主要通过以下方法从来自于中国新疆天山山脉中段，人迹罕至、植被茂密的地表腐殖土层中分离得到上述唾液乳杆菌菌株。

将采集的野生鸡粪便直接接种于MRS液体选择培养基中进行细菌增殖富集，再接种至MRS固体选择培养基，挑取特征明显的菌落反复划线分离，直至分离出形态、大小一致的菌落，进行革兰氏染色，对菌体形态进行显微观察。反复接种纯化后，即得。

经法国梅里埃公司API50CH鉴定系统进行菌种判定，本发明所分离得到的唾液乳杆菌菌株HVRIC5的分类地位属于：乳杆菌属唾液乳酸杆菌（Lactobacillus salvarius）。

该菌株在MRS平板上的菌落为半球形，表面光滑湿润，呈乳白色，直径约为1-2mm，大小均一；革兰氏染色观察，该菌株为典型革兰氏阳性，显微镜下菌体为不太规则的粗大杆状，两端钝圆，无芽孢；在MRS液体培养基中生长良好，呈均匀浑浊生长，12小时在试管底部出现白色沉淀。最适生长温度为37℃，适宜pH为4.5-7.0，能在质量分数为5%氯化钠肉汤中生长。本发明的唾液乳杆菌（Lactobacillus salvarius）HVRIC5菌株可以用于调节动物肠道菌群，促进动物生长。