[发明专利]一种褪黑素的测定方法无效
| 申请号： | 201310207854.2 | 申请日： | 2013-05-28 |
| 公开（公告）号： | CN103278499A | 公开（公告）日： | 2013-09-04 |
| 发明（设计）人： | 卞禹卜;陶艳伟;卫喜燕;杨晓慧;李林 | 申请（专利权）人： | 无锡中德伯尔生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/78 | 分类号： | G01N21/78;G01N1/28 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋;侯桂丽 |
| 地址： | 214174 江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 褪黑素 测定 方法 | ||
1.一种褪黑素的测定方法，包括如下步骤：
(1)用溶剂萃取待测样品，提取褪黑素；
(2)将步骤(1)的萃取液过滤或离心分离后，蒸发；
(3)在步骤(2)蒸发后的萃取液中加入检测剂和缓冲溶液，加热，观察颜色。
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)中所述的溶剂为有机溶剂，优选为甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、乙酸乙酯、四氢呋喃或乙醚中的1种或至少2种以上的混合物，进一步优选为乙醇、丙酮或乙醚中的1种或至少2种以上的混合物。
3.根据权利要求1或2所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)中所述的待测样品为药品或保健品，优选为固态的药品或保健品。
4.根据权利要求1-3任一项所述的测定方法，其特征在于，步骤(2)中所述的蒸发为在40-70℃水浴中蒸发至干，所述的蒸发温度优选为40℃。
5.根据权利要求1-4任一项所述的测定方法，其特征在于，步骤(3)中所述的检测剂为Fe(Ⅲ)-邻菲罗啉或/和Fe(Ⅲ)-联吡啶的盐酸溶液。
6.根据权利要求5所述的测定方法，其特征在于，所述检测剂的浓度为1-5g/L，优选为1-4g/L，进一步优选为1.5-3g/L。
7.根据权利要求1-6任一项所述的测定方法，其特征在于，步骤(3)中所述的缓冲溶液为醋酸钠-醋酸缓冲液；
优选地，检测剂为Fe(Ⅲ)-邻菲罗啉时醋酸钠-醋酸缓冲液pH为3-6，优选为3-5，进一步优选为4.6；检测剂为Fe(Ⅲ)-联吡啶时醋酸钠-醋酸缓冲液pH为1-5，优选为2-4，进一步优选为2.5；检测剂为Fe(Ⅲ)-邻菲罗啉与Fe(Ⅲ)-联吡啶混合时醋酸钠-醋酸缓冲液pH为1-6，优选为2-5。
8.根据权利要求1-7任一项所述的测定方法，其特征在于，步骤(3)中所述的加热温度为60-80℃，优选为60-70℃，进一步优选为70℃；
优选地，所述的水浴加热时间为2min以上，优选为5min以上，进一步优选为10min。
9.根据权利要求1-8任一项所述的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取固态的待测样品，研磨均匀，加入适量有机溶剂，用磁力搅拌器搅拌，静置片刻；
(2)将步骤(1)的萃取液过滤或离心分离后，在40-70℃水浴中蒸发至干；
(3)在步骤(2)蒸发后的萃取液中加入1-5g/L Fe(Ⅲ)-邻菲罗啉或/和Fe(Ⅲ)-联吡啶的盐酸溶液，pH为1-6的醋酸钠-醋酸缓冲液，60-80℃水浴加热2min以上，冷却至室温，出现密集的红色浑浊，则判断样品中含有褪黑素；未出现红色，则判断样品中不含褪黑素。
10.权利要求1-9任一项所述的检测方法在制备褪黑素快速检验试剂盒中的用途。
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