[发明专利]一种冰冻透明的组织观测方法

说明书

 

技术领域

本发明涉及一种冰冻透明的组织观测方法。

 

背景技术

在生命科学实验等组织学检验中，通常需要采用切片的方式来对组织进行观察研究。传统的组织观测方法中，通常是直接将包埋剂放置在冷冻头上，然后将新鲜的待切片组织进行包埋，待其冷冻后放到切片机上进行切片，再将切片后的组织放置在载破片上并采用染色剂进行染色，染色完成后再置放在显微镜的工作台上观察组织。采用该方式来进行组织观察时需要对样本进行破坏处理，无法保证样本的完整性，操作也较为麻烦，而且对于一些尺寸较小的样本而言，采样上述方式在实施时切片过程较难完成，且切片机在切片时对切片的厚度有一定的限制，不能完全观测到所有切面的组织。

 

发明内容

本发明的目的是提供一种冰冻透明的组织观测方法，该组织观测方法简单易行，具有良好的适用性。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种冰冻透明的组织观测方法，用于对样本进行组织观测，所述组织观测方法包括如下步骤：

（1）将冷冻机的冷冻头放置在显微镜的工作台上，所述冷冻头具有载物台；

（2）选用能够在冷冻状态下凝固的包埋剂，将所述包埋剂滴在所述载物台上，并使得覆盖在所述载物台上的所述包埋剂的长度、宽度、厚度分别大于所述样本的长度、宽度、高度；

（3）待覆盖在所述载物台上的所述包埋剂至半凝固状态，所述半凝固状态下所述包埋剂上未凝部分的尺寸稍大于所述样本的尺寸，将所述样本置放在所述包埋剂的所述未凝部分上，按照样本观测需求调整所述样本在所述包埋剂上的位置，静置至所述包埋剂完全凝固；

（4）往所述样本上再滴加包埋剂，使得所述包埋剂凝固后形成对所述样本的完全包覆；

（5）对包覆有所述包埋剂的所述样本进行修片，将所述样本的表壳去除；

（6）往所述样本上滴加质量百分比为20%～50%的甘油，待所述样本透明化，调整所述显微镜的镜头观察所述样本的组织图像。

优选地，所述冷冻机为半导体冷冻切片机。

优选地，所述包埋剂为OTC组织包埋剂。

优选地，所述步骤（2）中，覆盖在所述载物台上的所述包埋剂的长度、宽度、厚度分别为所述样本的长、宽、高的1.2～1.3倍。

优选地，所述步骤（6）中，观察所述样本的所述组织图像时对所述组织图像进行拍照记录。

进一步优选地，所述拍照记录在滴加所述甘油后的2min～3min内进行。

优选地，所述显微镜为数码体视显微镜。

由于上述技术方案的运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：本发明的一种冰冻透明的组织观测方法，其中通过直接在冷冻头的载物台上采用包埋剂将样本进行冷冻包埋，再进行修片并做透明化处理即可进行组织观测，该过程中无需对样本进行染色处理和切片处理，定位方便且在操作过程中无需进行移动，实验前后能够保持样本形态、形状以及颜色的一致性，满足多种类型样本的组织观测要求，其操作简单易行，具有良好的适用性。

 

附图说明

附图1为本发明中冷冻机与显微镜的连接示意图。

 

具体实施方式

下面结合附图和具体的实施例来对本发明的技术方案作进一步的阐述。