[发明专利]一种cTnI、Myo和CK-MB三合一胶体金法检测试纸条、试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于免疫诊断试剂技术领域，涉及一种利用胶体金免疫层析技术以及双抗体夹心法原理定性检测临床标本（全血/血清/血浆）中人心肌肌钙蛋白I、肌红蛋白和肌酸激酶同工酶的一种试纸条、试剂盒及其制备方法。

背景技术

心肌梗死是冠心病中最凶险的一种，随着生活水平的提高，其发病率成逐年上升的趋势，现已对人类健康和生存造成了重大的威胁，是世界上各国面临的社会问题。有统计显示，以前在发作急性心肌梗死的病人中，三分之二没被送入医院就已经死亡，而在被送入医院的患者中，死亡率仍高达30％。

从临床来看，约有25%的心肌梗死患者发病早期没有典型的临床症状，约50%左右的心肌梗死患者缺乏心电图（ECG）的特异改变。由于缺乏典型的临床表现，会使医生迟迟无法确诊，从而延误治疗。在这种情况下，心肌损伤生化标志物的检测在诊断急性心肌梗死时尤为重要。

目前，主要有如下三种心肌损伤生化标志物：

（1）肌钙蛋白I（cTnI）是分子量22.5kD的心肌蛋白、肌钙蛋白T(TnT)和肌钙蛋白C(TnC)一起形成肌钙蛋白复合体，从而对细胞内钙离子信号的传递和肌动-肌球蛋白的相互作用起着极其主要的作用。心肌梗塞发作后肌钙蛋白复合体分解，cTnI快速地释放入血液循环。尽管骨髂肌中也有肌钙蛋白I，但其氨基酸组成和心肌cTnI不同，造成二者的免疫活性不同，进而保证了心肌cTnI测试的准确性。心肌梗死症状发作后4-6小时cTnI才达到正常值上限，12-24小时后达到最高浓度，有时能维持6-10天。正常血清cTnI低于0.06ng/ml，有些患者cTnI可高达1,300ng/ml。与CK-MB相比，cTnI对心肌损伤的诊断敏感性更高，特导性更强，持续时间更长。因此cTnI测定对再发心肌梗死的诊断尤其有帮助，还可诊断微小心梗，故对不稳定性心绞痛（UA）和非ST抬高的心肌梗死的鉴别有极大帮助。

（2）肌红蛋白（Myo）可来自骨骼肌和心肌，在肌肉中有运输氧和储氧功能。因为Myo分子小，不通过淋巴结就可直接进入血液循环，所以心肌轻度受损时即从心肌细胞直接进入血液循环。美国纽约心脏病协会的建议认为，Myo是用于心肌损伤的最佳早期标志物。Myo在心肌损伤时能很快释放出来，即在出现症状后的1-3小时就可见于血清中（敏感性60％），其高峰为AMI后的3-6小时（敏感性90％）。由于其半衰期很短，故在较晚（6-8小时后）对心肌梗死的诊断价值就很小。

（3）肌酸激酶为细胞内重要的能量代谢酶，分布广泛，以肌细胞中最多，由二个亚基组成二聚体；肌酸激酶同工酶（CK-MB）主要存在于心肌细胞的外浆层，在心肌损伤3-4小时后，开始在血液中升高，更具心脏特异性。一直是临床诊断心肌损伤的心肌酶谱中最具特异性的酶。

综上所述，由于心肌损伤后cTnI、Myo和CK-MB释放动力学的差异，cTnI、Myo和CK-MB联检对诊断急性心肌梗塞(AMI)有协同互补作用，cTnI（肌钙蛋白I）,Myo(肌红蛋白）,CK-MB三合一检测比单项cTnI检测更有助于心梗的早期诊断。三种标志物的诊断优势相结合，具有更好的灵敏度和特异性，使您的诊断更精准。

目前，大多数只进行心肌梗塞的单项指标检测，检测误差大，容易使医生误判或者漏判，而一种cTnI（肌钙蛋白I）、Myo(肌红蛋白）、CK-MB（肌酸激酶同工酶）三合一快速检测法使医生的诊断更准确定性定量三判断，是国内外公认的临床诊断心肌梗死较为可靠的检测法，能够为临床快速诊断心肌梗塞提供全面可靠的、准确的方法。

发明内容

针对现有检测技术的不足，本发明的目的在于提供一种cTnI（肌钙蛋白I）,Myo(肌红蛋白）和CK-MB（肌酸激酶同工酶）三合一检测试纸条、试剂盒及其制备方法。采用本发明的试纸条或试剂盒，可通过一次操作实现快速检测人肌钙蛋白I、肌红蛋白和肌酸激酶同工酶，从而简化操作过程，实现快速检测的目的。

本发明的第一个目的是这样实现的：

一种cTnI、Myo和CK-MB三合一胶体金法检测试纸条，包括底板，在底板的一面顺次相互搭接地粘附有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述样品垫上贴有全血滤血膜，所述金标垫为涂覆有单克隆抗体cTnI/Myo/CK-MB胶体金标记物的玻璃纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上有三条检测线和一条质控线，所述三条检测线分别包被有cTnI抗体、Myo抗体、CK-MB抗体，所述质控线上包被有羊抗鼠IgG抗体。