[发明专利]一种新的戊胺化合物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种新化合物的应用。

背景技术

肿瘤是危害人类健康的严重疾病，肿瘤的防治工作一直是医药研究领域的重点。目前，由于工业发展中带来的环境污染等问题，人类的生存环境质量不断下降，造成肿瘤疾病的发病率与致死率不断上升。放疗、化疗是目前治疗肿瘤的主要手段。但化疗、放疗在抑制了癌细胞发育的同时也抑制了正常细胞的发育，降低了机体免疫力，导致新的并发症。治疗肿瘤疾病的特效药并不能令人满意，目前临床所用细胞毒性药物选择性不高，导致对正常细胞的恶性杀伤，限制了其应用。因此，寻找新的、无创伤、无细胞毒作用的抗肿瘤药物成为国际医药领域的重要方向。本发明涉及一种新的多胺化合物，经过体外、体内抗肿瘤实验证明对于肝癌细胞的生长具有较好的抑制作用。

发明公开

本发明提供了一种抗肿瘤化合物，具体为下述化合物或其药学上可接受的盐：

所述式化合物或其药学上可接受的盐可应用于制备预防和/或治疗肿瘤药物中。所述肿瘤具体可为肝癌或肺癌。所述预防和/或治疗肿瘤药物可为任何剂型，如注射液、冻干粉、口服片剂、胶囊、滴丸或颗粒剂。

实施例1：化合物3的体外抑瘤试验

实验材料

药物及试剂：化合物3，白色粉末，由中山大学药学院提供。

RPMI1640培养基：GIBCO公司生产。

新生牛血清(超级)，杭州四季青生物工程材料有限公司。

胰蛋白酶，Sigma公司生产。

细胞株：人肝癌细胞株SMMC-7721、人肝癌细胞株S180、肝癌细胞HEPG2、肝癌细胞BEL7402均购自中国医学科学院药物研究所药理室。

仪器：CO₂培养箱(Forma 3110，USA)，超净工作台(哈东联BCN-1360B)，酶标仪(Bio-Rad 550，USA)，倒置显微镜(Nikon TE2000，Japan)，细胞培养瓶(Costar，USA)，96孔细胞培养板(Costar，USA)。

实验方法：

药物及试剂配制：RPMI1640培养基一袋加水一升，补加2克碳酸氢钠，10万单位青霉素和100mg链霉素，调节pH值至7.4，用0.22μm除菌滤膜过滤除菌。95ml培养基加灭活新生牛血清5ml即为完全培养液。胰蛋白酶用D-hanks缓冲液配成0.25％溶液，过滤除菌后4℃保存备用。

准确称取Zonk088CT 100mg，加到灭菌的1.5ml离心管中，加入DMSO 1ml，配成100mg/ml原液，-20℃冷冻保存。临用前融化后取适量以完全培养液稀释成相应浓度应用。

细胞培养及传代：所有细胞均贴壁培养于含10ml完全培养液细胞培养瓶中，于37℃、5％CO₂、饱合湿度下培养。细胞长满瓶底后用灭菌D-hanks液洗两次，加0.25％胰蛋白酶消化细胞2分钟，倒掉胰蛋白酶，待轻摇细胞能完全脱落后，加完全培养液30ml后，用移液管吹散细胞，分装于3个新的细胞培养瓶中，继续培养。

药物处理：取刚刚长满的细胞一瓶，胰蛋白酶消化后收集细胞，用移液管吹打均匀，取两滴细胞悬液台盼蓝染色，于显微镜下计数活细胞数目，用完全培养液调整细胞数目至1×10⁵个细胞/毫升。于96孔细胞培养板中每孔加入100μl细胞悬液，将培养板置于CO₂培养箱中培养12小时，取出培养板后于每孔中补加100μl含不同浓度化合物3的完全培养液，使得药物终浓度分别为80.0、60.0、45.0、33.8和25.3μg/ml，每个浓度设4个平行孔，另设4孔细胞加入不含药完全培养液作阴性对照孔，4孔细胞加入含长春新碱的完全培养液作阳性对照，长春新碱终浓度为5μg/ml。加完药后培养板于微孔板振荡器上振荡混匀，置于CO₂培养箱中继续培养48小时。取出培养板，每孔加入10μl 5mg/ml的MTT液，振荡混匀，继续培养4小时，弃去原培养液，于每孔加入DMSO 150μl，充分振荡以溶解蓝紫色结晶，于Bio-Rad 550酶标仪上测定各孔的光吸收，测定波长570nm，参考波长630nm。

根据各孔OD值计算药物对细胞增殖的抑制率：

根据药物浓度的对数对应的抑制率作直线回归，得到直线方程，计算抑制率在50％时对应的药物浓度即为化合物3对肿瘤细胞的半抑制浓度(IC₅₀)。