[发明专利]一株强毒迟缓爱德华氏菌疫苗株及其应用

权利要求书

1.一株迟缓爱德华氏菌菌株1101，其特征是所述菌株为分离自海水养殖鱼类的野生菌株迟缓爱德华氏菌菌株1101，其保藏编号为：CGMCC No.7197。

2.如权利要求1所述的迟缓爱德华氏菌菌株1101，其特征在于所述菌株的16s rRNA、EsrB、H1yB基因上游碱基序列和16s-23s rRNA区间碱基序列如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示，这些基因具有该菌株的特征性。

3.如权利要求1所述的迟缓爱德华氏菌菌株1101，其特征在于所述菌株对海淡水鱼类具有较强的致病性，注射攻毒的半数致死量在1.0×10²-9.9×10³CFU/g的范围。

4.如权利要求1所述的迟缓爱德华氏菌菌株1101，其特征是该菌株可培养于LB、TSB或2216E培养基，培养方法如下：从保存的菌种中挑取少量划线于上述培养基的固体平板，培养温度范围为28-37℃，在2216E琼脂平板中，28℃培养48h后可形成直径小于0.5mm的白色细小菌落；在TSB和LB琼脂平板中，37℃培养36h后可形成直径约0.5mm的微黄色圆形菌落，将单菌落接种于上述培养基的培养液中，28-37℃，180r/min摇瓶培养至OD₆₀₀为0.5-0.6获得该菌株的新鲜菌液。

5.权利要求1所述的迟缓爱德华氏菌菌株1101的应用，其特征是该菌株的抗原包含针对爱德华氏菌保护性抗原，该保护性抗原具有良好的免疫原性和高度保守性，用该菌株制备的抗原经免疫接种后对爱德华氏菌感染具有良好的免疫保护作用，该菌株适用于生产爱德华氏菌的疫苗。

6.权利要求5所述的迟缓爱德华氏菌菌株1101的应用，其特征在于所述的抗原的制备方法包括灭活菌体、菌蜕成分、减毒菌株、保护性抗原、抗原亚单位、抗原决定簇或抗原基因表达载体的表达产物的任何一种或一种以上。

7.权利要求5所述的迟缓爱德华氏菌菌株1101的应用，其特征在于生产的疫苗可以是使用该菌株制备的抗原的单一成分，也可以使用该菌株制备的抗原与其他细菌的抗原混合生产联合疫苗，也可以将制备的单一或联合疫苗的抗原添加佐剂生产疫苗。

8.权利要求5所述的迟缓爱德华氏菌菌株1101的应用，其特征在于所生产的疫苗采用注射免疫、创伤免疫、浸浴免疫和口服免疫等免疫接种方式。

9.如权利要求7所述的迟缓爱德华氏菌菌株1101的应用，其特征在于所生产的灭活疫苗注射免疫接种时，可采用腹腔或肌肉注射两种方式，使用的剂量为10⁴-10⁸CFU/g；创伤免疫或浸浴免疫接种时，浸泡水体中灭活疫苗的浓度为10⁵-10⁹CFU/mL，浸泡时间2-60min；口服免疫接种时，灭活疫苗可添加于配合饲料中，配合饲料中的10⁵一10¹⁰CFU/g，连续投喂14-30天。

10.权利要求1所述的迟缓爱德华氏菌株1101在制备预防爱德华氏菌感染的药物中的应用，所述药物免疫接种的对象包括海水养殖鱼类、半咸水养殖鱼类、洄游鱼类、淡水养殖鱼类、观赏鱼类、淡水养殖的两栖类和爬行类。