[发明专利]一种恢复SAMe合成酶活力的方法有效
申请号: | 201310155528.1 | 申请日: | 2013-04-28 |
公开(公告)号: | CN103224917A | 公开(公告)日: | 2013-07-31 |
发明(设计)人: | 付大雁 | 申请(专利权)人: | 北京凯因科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100176 北京市大*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 恢复 same 合成 活力 方法 | ||
1.一种恢复SAMe合成酶活力的方法,所述方法通过将已使用后活性降低的SAMe合成酶浸泡在配置好的复苏液中,并于室温浸泡并搅拌后滤去液体,所述复苏液是由摩尔浓度为0.5-5mM的底物ATP、0.5-5mM的L-甲硫氨酸,质量浓度为0.001%-0.1%的载体,所述载体选自海藻糖、壳聚糖、葡聚糖、蔗糖、明胶或PEG40,摩尔浓度为0.01-0.5mM的金属离子盐、浓度为0.01%-0.5%(V/V)的表面活性剂组成。
2.权利要求1所述的方法,其中所述载体为质量浓度为0.01%-0.1%海藻糖。
3.权利要求1所述的方法,其中所述金属离子盐为Mg2+或/和K+的盐酸盐,所述Mg2+的摩尔浓度为0.05-0.2mM,所述K+的摩尔浓度为0.01-0.1mM。
4.权利要求1所述的方法,其中所述表面活性剂是浓度为0.01%-0.5%(V/V)的吐温-20。
5.权利要求1-5中任意一权利要求所述的方法,具体包括如下步骤:
(1)配置复苏液,所述复苏液由所述的复苏液,由0.5-5mM的ATP、0.5-5mM的L-甲硫氨酸、0.001%-0.1%(重量)的海藻糖、0.01%-0.5%(V/V)的吐温20及以及0.05-0.2mM的MgCl2、0.01-0.1mM的KCl组成;
(2)将经过多次反应而导致活力下降的SAMe合成酶用水冲洗干净,并于室温下置于复苏液中,搅拌3-6小时;
(3)滤去液体,得到复苏后的SAMe合成酶。
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