[发明专利]一种从链霉菌发酵液中提取多抗菌素的方法

权利要求书

1.一种从链霉菌发酵液中提取多抗菌素的方法，其具体步骤如下：

（1）取链霉菌发酵液，用酸调节pH至1.0-4.0，将发酵液离心，收集上清液，过滤，得到澄清液体；

（2）将步骤（1）所得的澄清液体倒入分液漏斗中，再向其中加入有机溶剂，振荡，静置0.5-2h，取上清液，旋蒸，得旋蒸液；

（3）将步骤（2）所得的旋蒸液用酸调节pH至1.0-4.0，转移到装有阳离子交换树脂的床层上进行吸附，并用盐溶液进行洗脱，每2-5min收集一次洗脱液，洗脱至洗脱液用紫外分光光度计没有检出峰为止；合并有检出峰的洗脱液，进行旋蒸，得浓缩液；

（4）将步骤（3）所得的浓缩液转移至葡聚糖凝胶柱，用洗脱液进行洗脱，每5-10min收集一次，洗脱至洗脱液用紫外分光光度计没有检出峰为止，合并有检出峰的洗脱液；

（5）将步骤（4）所得的洗脱液旋蒸，浓缩；

（6）将步骤（5）所得浓缩液用酸调节pH值至1.0-4.0，再加入有机溶剂，直至晶体不再析出，得到重结晶晶体；

（7）将步骤（6）中的重结晶晶体用真空干燥箱进行干燥。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中离心的转速为8000-10000rmp/min；离心时间为15-25min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）、（3）和（6）中所述的酸均为HCl、H₂SO₄或H₃PO₄溶液，其浓度均为2.0-6.0mol/L。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）中所述的有机溶剂为乙酸乙酯，有机溶剂与澄清液体的体积比为0.1-0.5：1；旋蒸后，旋蒸液与上清液的体积比为1：（50-100）。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）中所述阳离子交换树脂的种类为001×4、001×7或110型阳离子交换树脂，离子柱径与高比为1：（8-12）；盐溶液为NaCl或KCl溶液，其质量百分浓度为10-30%，盐溶液的流速为5-15mL/min；旋蒸液其体积与洗脱液的体积比为1：（50-100）。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）和（4）中紫外分光光度计的多抗菌素检测峰范围在240-280nm之间。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）中所述的葡聚糖凝胶柱为G-15或G-25，凝胶柱径与高为1：（5-7）；洗脱液为去离子水或超纯水；洗脱液的流速为0.5-2mL/min。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（5）中所述的旋蒸液的体积与洗脱液的体积比为1：（50-100）。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（6）中所述的有机溶剂为无水乙醇或丙酮。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（7）中所述的真空干燥箱的温度为60～80℃，真空度为－0.075～－0.01MPa，干燥时间为12～24小时。