[发明专利]一种灰楸的组织培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种木本植物的组织培养方法，尤其是涉及一种灰楸的组织培养方法。

背景技术

灰楸（Catalpa fargesii）为紫葳科（Bignoniaceae）梓树属（Catalpa）高大落叶乔木，是我国传统栽培的优质珍贵用材及园林观赏树种。其分布范围广，主要分布于我国中西部地区，以渭河、泾河、汾河流域及秦岭山地为集中区，散生于村庄周边及山谷中。灰楸根系发达，生长速度快，抗风、固土能力强，耐寒耐旱，材质纹理通直、坚韧致密，是优质速生用材树种。

通常，灰楸通过嫁接和扦插来繁殖。嫁接繁殖需提前1年培育砧木（梓树），翌年采集母本1年生枝条或苗干上的芽作为接穗；嫁接过程中，由于接穗直径生长一般大于砧木，导致接口愈合较差，成活率一般在70%左右，嫁接苗抗风性较弱，且砧木基部多萌芽，需不断抹芽，增加了管理成本。扦插繁殖需采集当年生枝条、苗干或根进行埋干（根）催芽，采集半木质化嫩枝进行扦插，对催芽床和扦插床温、湿度及空气相对湿度要求较为严格，管理成本高，扦插成活率较低，一般为50%左右。

组织培养是一种高效的无性繁殖方式，繁殖效率高且成本较低，是解决灰楸优良无性系快繁的有效手段，目前尚未见有关灰楸优良无性系组织培养方面的报道。

发明内容

为了克服嫁接和扦插等无性繁殖技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种灰楸的组织培养方法，该方法可以高效地获得优质的灰楸组培苗。

本发明提供的灰楸组织培养方法，包括：采集灰楸母树一年生萌生枝条依次进行枝条水培催芽、无菌化处理、芽的诱导和增殖、不定芽生根培养、炼苗与移栽，得到灰楸组培苗。

所述枝条水培催芽包括：采集灰楸母树一年生萌生枝条，在室内水培（自来水）催芽后，摘取萌发芽。最好待萌发芽长度为10cm左右，最优选8～12cm时摘取。

所述无菌化处理包括：将水培催芽后的萌发芽用自来水冲洗30min，之后用质量浓度为10%的次氯酸钠溶液浸泡6～7min，之后再经无菌水冲洗4～5次，最后用无菌滤纸吸干表面水分。

所述芽的诱导和增殖包括：将无菌化处理过的萌发芽截成茎段，然后接种于诱导培养基上，培养35～50天，得到分化芽；然后再将该分化芽截成茎段接种于增殖培养基上，培养30～45天后形成不定芽。

优选地，无菌化处理过的萌发芽截成的茎段，以及分化芽截成的茎段上至少有一个腋芽。

更优选地，所述芽的诱导和增殖包括：将无菌化处理过的萌发芽截成长度为1.5cm左右，最优选1.4～1.6cm的茎段，然后接种于诱导培养基上，培养35～50天，得到分化芽；然后再将该分化芽截成长度为1.0cm左右，最优选0.8～1.2cm的茎段接种于增殖培养基上，培养30～45天后形成不定芽。

其中，所述芽的诱导分化和增殖培养所用培养基为DKW基本培养基，还包括：0.6～1.4mg·L^-16-BA（6-苄基氨基嘌呤，benzylaminmopurine），0.1～0.3mg·L^-1IBA（吲哚丁酸，Indole-3-Butytric acid），25g·L^-1蔗糖和4.5g·L^-1琼脂。优选为：DKW基本培养基，0.75～1.2mg·L^-16-BA，0.13～0.23mg·L^-1IBA，25g·L^-1蔗糖和4.5g·L^-1琼脂。

进一步地，所述芽的诱导分化和增殖培养基的pH为5.8。

进一步地，芽的诱导分化过程中，培养3天后，茎段腋芽处芽开始膨大；8～10天茎段基部愈伤组织开始膨大；共诱导培养35～50天（优选40～48天）分化芽的芽长大于0.7cm。

进一步地，将该分化芽截成茎段接种于增殖培养基上，培养8～10天后开始增殖分化形成不定芽，30～45天（优选34～40天）后不定芽可以长到1.0cm以上。

所述不定芽生根培养包括：将增殖得到的不定芽截成茎段，转接入生根培养基中诱导生根，28～40天后长成生根苗。