[发明专利]一种灰楸的组织培养方法

权利要求书

1.一种灰楸组织培养方法，包括：采集灰楸母树一年生萌生枝条依次进行枝条水培催芽、无菌化处理、芽的诱导和增殖、不定芽生根培养、炼苗与移栽，得到灰楸组培苗。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述枝条水培催芽包括：采集灰楸母树一年生萌生枝条，在室内水培催芽后，摘取萌发芽。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述无菌化处理包括：将水培催芽后的萌发芽用自来水冲洗30min，之后用质量浓度为10%的次氯酸钠溶液浸泡6～7min，之后再经无菌水冲洗4～5次，最后用无菌滤纸吸干表面水分。

4.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其特征在于，所述芽的诱导分化和增殖包括：将无菌化处理过的萌发芽截成茎段，然后接种于诱导培养基上，培养35～50天，得到分化芽；然后再将该分化芽截成茎段接种于增殖培养基上，培养30～45天后形成不定芽。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述芽的诱导和增殖培养所用培养基为DKW基本培养基，还包括：0.6～1.4mg·L^-16-BA，0.1～0.3mg·L^-1IBA，25g·L^-1蔗糖和4.5g·L^-1琼脂；优选为：DKW基本培养基，还包括：0.75～1.2mg·L^-16-BA，0.13～0.23mg·L^-1IBA，25g·L^-1蔗糖和4.5g·L^-1琼脂；所述芽的诱导分化和增殖培养基的pH为5.8。

6.根据权利要求1～5任意一项所述的方法，其特征在于，所述不定芽生根培养包括：将增殖分化得到的不定芽截成茎段，转接入生根培养基中诱导生根，28～40天后长成生根苗。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述不定芽生根培养所用的培养基为1/2MS基本培养基，还包括：0.25～0.35mg·L^-1IBA，0.025～0.035mg·L^-1NAA，10g·L^-1蔗糖和5.0g·L^-1琼脂；优选为：1/2MS基本培养基，还包括：0.28～0.32mg·L^-1IBA，0.029～0.032mg·L^-1NAA，10g·L^-1蔗糖和5.0g·L^-1琼脂；所述不定芽生根培养基的pH为5.8。

8.根据权利要求1～7任意一项所述的方法，其特征在于，所述炼苗与移栽包括：将不定芽生根培养出的生根苗置于温室中炼苗后移栽，移栽后遮阴；生根苗移栽的基质为泥炭土：珍珠岩=3～5:1，优选4:1。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，生根苗移栽的基质还可包含多菌灵，用量为200g/m³。

10.根据权利要求4～9任意一项所述的方法，其特征在于，所述的芽的诱导分化和增殖、不定芽生根培养的温度均为22～26℃，光照强度均为1800～2200勒克斯，光照时间均为12～15小时/每天。