[发明专利]一种牛口蹄疫病毒A型合成肽及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种合成肽，具体地，涉及一种牛口蹄疫病毒A型合成肽及其制备和应用。 

背景技术

口蹄疫（Foot-and-mouth disease，FMD）是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus，FMDV)感染引起的偶蹄动物共患的急性、热性、高度接触传染性和可快速远距离传播的烈性传染病。该病的暴发流行，给畜牧业生产和进出口贸易造成极大损失，因此，联合国粮农组织和国际兽疫局将其列为头号必须报告的传染病。 

自1879年Loeffer发现该病以来，人们为控制该病做了不懈努力。疫苗接种是特异性预防FMD的可靠和有效手段，安全有效的疫苗是成功地预防、控制乃至最终消灭FMD的先决条件。FMD弱毒疫苗和灭活疫苗等常规疫苗都具有良好的免疫原性，在预防和控制FMD的过程中发挥着重要作用，但由于存在病毒毒力返强、病毒灭活不彻底、活病毒逃逸疫苗加工厂等不安全因素，以及不能产生交叉保护、无法区别免疫动物和自然感染动物、灭活苗免疫后常出现食欲减退、呕吐、 体温升高等不良反应，有的甚至引起死亡等问题，促使人们不断寻求一种更加安全、有效、广谱的FMD疫苗。近年来, 随着生物技术在兽医生物制品领域应用的不断深化和发展，疫苗制造技术和免疫学技术得到迅猛发展，FMD基因工程疫苗如亚单位疫苗、可饲疫苗、合成肽疫苗、蛋白质载体疫苗、基因缺失疫苗、活载体疫苗、核酸疫苗等不断涌现。其中表位疫苗就是近年发展起来的一种独特的疫苗设计思路，它是以抗原表位为基础制备的疫苗。一般，免疫系统识别、递呈抗原时仅需要十几个氨基酸，与抗体结合仅需要几个氨基酸，所以利用定位精确、氨基酸序列较短的抗原表位，既能够有效地被免疫系统识别、递呈，又能诱发机体产生特异性体液和细胞免疫应答；同时较短的序列很容易合成，对载体的克隆能力要求较低，易于在载体中插入多个表位构建基因工程多表位疫苗。对于FMDV这样具有高度变异性的病毒，应用的疫苗株可能因与当前的流行株不匹配而不能提供有效的免疫保护，然而基于多表位疫苗含有广谱的表位信息，可以避免因病毒变异而造成的疫苗免疫失败，同时又可以同野毒株区别开来，从而为疾病的进化提供条件。表位疫苗，与弱毒疫苗和灭活疫苗相比，减少了疫苗中与免疫无关的成分，其免疫所产生的抗体针对靶病毒，特异性强，更加安全可靠，而且便于规模化生产，作为一种新型基因工程疫苗，具有广阔的开发前景。 

表位疫苗通常包括合成肽疫苗（synthetic peptide vaccine）、重组表位疫苗(recombinant epitope-based vaccine)以及表位核酸疫苗(epitope DNA vaccine，minigenes/epigenes)等。其中合成肽疫苗，即根据免疫抗原表位的氨基酸序列，用化学合成法人工合成抗原决定簇小肽，辅以适当的载体与佐剂制备而成的一种新型基因工程疫苗。近年来FMD合成肽疫苗的迅猛发展及广泛应用已使其在FMD的防控工作中发挥了重要作用。合成肽疫苗的研究最早始于FMDV合成肽疫苗，主要集中在FMDV的单独B细胞抗原表位或与T细胞抗原表位结合而制备的合成肽疫苗研究。Doel等分别用A、O、C血清型FMDV VP1序列的141～158和200～213肽段组成的40个氨基酸合成肽，免疫牛和豚鼠，结果每个肽都产生了高水平的特异性中和抗体,在豚鼠中O、A型肽可抗各自病毒的攻击并获得完全保护，C型较差(Doel et al, 1990)。