[发明专利]二茂铁多肽纳米线-葡萄糖氧化酶复合物及其制备和应用方法无效
| 申请号: | 201310106222.7 | 申请日: | 2013-03-29 |
| 公开(公告)号: | CN103224925A | 公开(公告)日: | 2013-07-31 |
| 发明(设计)人: | 阳明辉;李丁;王建秀;孙志方 | 申请(专利权)人: | 中南大学 |
| 主分类号: | C12N9/98 | 分类号: | C12N9/98;C07K5/065;C07K1/16;G01N27/48 |
| 代理公司: | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人: | 袁靖 |
| 地址: | 410083 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 二茂铁 多肽 纳米 葡萄糖 氧化酶 复合物 及其 制备 应用 方法 | ||
1.二茂铁多肽纳米线-葡萄糖氧化酶复合物的制备方法,其特征在于,包括以下任一方式所述的步骤:
称取二茂铁-二苯丙氨酸溶于乙醇,待溶剂挥发后,二茂铁-二苯丙氨酸逐渐析出并且自组装形成线型纳米材料A;将A加入蒸馏水中,在超声仪中超声震荡,使A由团聚状态分散开来得到B;取壳聚糖溶液与B混合,震荡超声后放置,使壳聚糖分子充分修饰到纳米线表面得到C;将C离心,移除上层溶液,然后至少重复进行两次加pH=7.4的磷酸缓冲溶液、离心和移除上层溶液的过程后滴入戊二醛的水溶液,形成混合物后震荡,然后离心得到D;向D中加入葡萄糖氧化酶水溶液,震荡,放置,即制成二茂铁多肽纳米线-葡萄糖氧化酶复合物;
或者
称取二茂铁-二苯丙氨酸溶于乙醇;待溶剂挥发后,二茂铁-二苯丙氨酸逐渐析出并且自组装形成线型纳米材料A;将A加入磷酸缓冲溶液,在超声仪中超声震荡,使A由团聚状态分散成单条纳米线状态,然后离心,再次加入磷酸缓冲溶液,离心,移除上层溶液,得到E,分别取壳聚糖溶液,戊二醛水溶液和葡萄糖氧化酶水溶液,加入E中配成二茂铁-二苯丙氨酸溶液,震荡超声,放置,即制成二茂铁多肽纳米线-葡萄糖氧化酶复合物。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,具体方法如下:
称取二茂铁-二苯丙氨酸溶于乙醇,配成2~5mg/mL的溶液;待溶剂挥发后,二茂铁-二苯丙氨酸逐渐析出并且自组装形成线型纳米材料A;称取A2mg加入1mL蒸馏水,在超声仪中超声震荡3~5分钟,使A由团聚状态分散开来得到B;取1mL质量分数1%的壳聚糖溶液与B混合,震荡超声2分钟后放置3小时,使壳聚糖分子充分修饰到纳米线表面得到C;将C离心,离心转数为5000转/分钟,离心5分钟,移除上层溶液,然后重复进行两次加pH=7.4的磷酸缓冲溶液、离心和移除上层溶液的过程后滴入500μL0.25%的戊二醛的水溶液,形成混合物后震荡半小时,然后离心得到D;按照二茂铁-二苯丙氨酸2mg/mL的配比,向D中加入10~15mg/mL的葡萄糖氧化酶水溶液,震荡2-5分钟,放置24h,即制成二茂铁多肽纳米线-葡萄糖氧化酶复合物;
或者
称取2~5mg二茂铁-二苯丙氨酸溶于1mL乙醇;将溶液烘干待二茂铁-二苯丙氨酸析出及自组装形成线型纳米材料A;称取A2mg加入1mL磷酸缓冲溶液,在超声仪中超声3~5分钟,使A由团聚状态分散成单条纳米线状态,然后5000转/分钟,离心5分钟,再次加入1mL磷酸缓冲溶液,离心,移除上层溶液,得到E,分别取100μL0.5%质量分数的壳聚糖溶液,450μL0.25%戊二醛水溶液和450μL10-15mg/mL的葡萄糖氧化酶水溶液,加入E中配成2mg/mL的二茂铁-二苯丙氨酸溶液,震荡超声2~5分钟,放置24小时,即制成二茂铁多肽纳米线-葡萄糖氧化酶复合物。
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