[发明专利]检测叶酸的酶联免疫试剂盒及其应用在审
| 申请号: | 201310104916.7 | 申请日: | 2013-03-28 |
| 公开(公告)号: | CN104076154A | 公开(公告)日: | 2014-10-01 |
| 发明(设计)人: | 何方洋;万宇平;冯才伟;罗晓琴;杨秀贤;贾芳芳;冯静;蒲小容 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦生物技术有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/82 | 分类号: | G01N33/82 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 检测 叶酸 免疫 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种检测叶酸的酶联免疫试剂盒,其特征在于包括:包被有包被原的酶标板、叶酸特异性抗体、酶标记物、叶酸标准品溶液、底物显色液、终止液、洗涤液、复溶液,所述包被原为叶酸偶联抗原,所述酶标记物为酶标记抗抗体。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述叶酸偶联抗原是由叶酸与载体蛋白偶联得到,所述载体蛋白可为鼠血清蛋白、甲状腺蛋白、牛血清白蛋白、兔血清蛋白、人血清蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或纤维蛋白原。
3.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述叶酸特异性抗体是以叶酸偶联抗原作为免疫原制备获得,所述叶酸特异性抗体为叶酸单克隆抗体或叶酸多克隆抗体。
4.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述抗抗体为羊抗鼠抗抗体或羊抗兔抗抗体。
5.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述酶标记物的标记酶为辣根过氧化物酶或细菌提取碱性磷酸酯酶,当标记酶为辣根过氧化物酶时,底物显色液A液为过氧化氢或过氧化脲,底物显色液B液为邻苯二胺或四甲基联苯胺,终止液为1~2mol/L的硫酸或盐酸缓冲液;当标记酶为细菌提取碱性磷酸酯酶时,底物显色液为对硝基磷酸盐缓冲液,终止液为1~2mol/L氢氧化钠。
6.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述洗涤液为pH值为7.4,含有0.5%~1.0%吐温-20、0.01‰~0.03‰叠氮化钠防腐剂、0.1~0.3mol/L的磷酸盐缓冲液。
7.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述复溶液为pH值为7.0,含有磷酸氢二钠,磷酸二氢钾,氯化钠,氯化钾。
8.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述叶酸标准品溶液的浓度分别为0μg/L、1μg/L、3μg/L、9μg/L、27μg/L、81μg/L。
9.一种检测样品中叶酸含量的方法,包括步骤:
(1)样品前处理;
(2)用权利要求1~7任一项所述的试剂盒进行检测;
(3)分析检测结果。
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