[发明专利]一种以滇池蓝藻水华为原料提取纯化微囊藻毒素LR、RR的方法

权利要求书

1.一种以滇池蓝藻水华为原料提取纯化微囊藻毒素LR、RR的方法，其特征在于，包括以下几个步骤： 

A、用生物网捞取滇池爆发期的水华，再通过过滤筛过滤藻样；

B、对处理后的藻样进行反复冻融处理；

C、将经过B步骤处理后的藻样浸泡在乙酸溶液中，浸泡过程中，同时配以超声波仪，进一步破坏细胞壁， 离心，取上清液；

D、上清液经活化后的固相萃取柱，以富集其中的微囊藻毒素；

E、富集结束后固相萃取柱清洗后，待干燥后，再洗脱微囊藻毒素；

F、将步骤E获得的洗脱液通过硅胶小柱，用甲醇洗脱硅胶小柱，从甲醇中吸附溶解于其中的微囊藻毒素；

G、洗脱液上旋转蒸发仪浓缩；

H、利用高效液相色谱，分离步骤G中的微囊藻毒素LR、RR；

I、提纯微囊藻毒素LR、RR。

2.如权利要求1所述的以滇池蓝藻水华为原料提取纯化微囊藻毒素LR、RR的方法，其特征在于，所述生物网采用25号浮游生物网，孔径为63μm。

3.如权利要求1所述的以滇池蓝藻水华为原料提取纯化微囊藻毒素LR、RR的方法，其特征在于，所述过滤筛采用孔径为230μm的 60目筛和孔径为76μm 的200目筛。

4.如权利要求1所述的以滇池蓝藻水华为原料提取纯化微囊藻毒素LR、RR的方法，其特征在于，步骤C中乙酸采用质量分数为5%的乙酸溶液，乙酸溶液的体积为藻样连同其流出液的5倍体积。

5.如权利要求1所述的以滇池蓝藻水华为原料提取纯化微囊藻毒素LR、RR的方法，其特征在于，展开液采用体积比为60%的三氯甲烷、30%的甲醇和10%的水。

6.如权利要求1所述的以滇池蓝藻水华为原料提取纯化微囊藻毒素LR、RR的方法，其特征在于，所述步骤H中，流动相采用pH=3、0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液和甲醇。

7.如权利要求6所述的以滇池蓝藻水华为原料提取纯化微囊藻毒素LR、RR的方法，其特征在于，流磷酸二氢钾缓冲溶液和甲醇的质量比为35%:65%。

8.如权利要求6所述的以滇池蓝藻水华为原料提取纯化微囊藻毒素LR、RR的方法，其特征在于，流动相的流速为10mL/min。