[发明专利]一种干酪乳杆菌活菌制剂的生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物发酵工程领域，具体地说是一种液体培养基经干酪乳杆菌厌氧发酵制备益生菌饲料添加剂的方法。

背景技术

干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）属于乳杆菌属（Lactobacillus），是革兰氏阳性兼性厌氧菌，不产芽孢，无鞭毛，不运动，兼性异型发酵乳糖，不液化明胶；最适生长温度为37℃，G+C含量为45.6~47.2%；菌体长短不一，两端呈方形，常成链；菌落粗糙，灰白色，有时呈微黄色，能发酵多种糖。干酪乳杆菌存在于人的口腔、肠道内含物和大便及阴道中，也常常出现在牛奶和干酪、乳制品、饲料、面团和垃圾中。

干酪乳杆菌是人与动物肠道中常见的细菌，被公认为安全级微生物，具有调节人体肠道，改善健康状况，可顺利通过胃酸、胆盐直接进入肠道，具有高度肠壁附着力，支持良好消化功能，能快速建立肠道优势益生菌群落。干酪乳杆菌对儿童轮状病毒胃肠炎而造成腹泻症状的减轻相当具有功效，可有效减轻及缩短抗生素腹泻的症状及时间，不仅具有抗酸碱的能力，而且具有免疫佐剂的功能，可提高某些免疫活性因子如IL2、TNFα及INF的分泌，其本身就具有低免疫原性、安全、方便、廉价等特点。干酪乳杆菌在发酵和成熟过程中能达到较高的菌体密度，具有很强的发酵产酸的能力，并能产脂酶和蛋白酶等酶类。目前，已经从干酪乳杆菌中分离纯化出了数种蛋白酶，包括肽酶和氨肽酶等，能够促进机体对营养物质的消化吸收。

干酪乳杆菌作为益生菌的一种，能够耐受有机体的防御机制，其中包括口腔中的酶、胃液中低PH值和小肠的胆汁酸等。所以干酪乳杆菌进入机体后可以在肠道内大量存活，起到调节肠内菌群平衡、促进消化吸收等作用。同时，干酪乳杆菌能够降低血浆胆固醇，增强宿主对微生物病原体的非特异性抵抗力，加快清除肠道内病原体，治疗肠道菌群紊乱和增强肠道透性，从而防止食物过敏和急性腹泻。此外，干酪乳杆菌还可使抗低密度氧化脂抗体和淋巴细胞增加，使粒细胞的噬菌作用明显增强，对宿主进行免疫调节，从而防止肿瘤的产生。

干酪乳杆菌应用于动物饲料的功能：

（1）抑制或杀灭肠道有害病原微生物，降低抗生素类药物用量，减少药物费用支出；（2）提高动物免疫力，促进动物生长发育，提高饲料利用率；（3）增加采食量，维持胃正常的厌氧环境，防止胃酸中毒，从而提高乳蛋白含量；（4） 改善饲养环境，降低粪便臭味，减少环境污染，净化水体；（5）改善畜产品质量，提高肉蛋品质；（6）提高母猪繁殖能力，降低仔猪死亡率。

将干酪乳杆菌经过高密度液体发酵，获得高菌体密度的发酵培养液，经植物淀粉吸附后，干燥，粉碎，制成的干酪乳杆菌微生态制剂应用于畜牧养殖，能够调节动物肠道菌群平衡，增强机体免疫力，提高抗病能力。

以往的干酪乳杆菌的发酵方式主要存在以下问题和不足：（1）采用厌氧培养罐或通过持续通入二氧化碳或氮气维持其厌氧环境来进行，原料不能重复使用，操作较复杂，成本较高；（2）大量采用胰化蛋白胨、酵母提取物、牛肉浸膏及其酶解产物等作为培养基主要营养成分，生产成本高；（3）液体发酵产物的后处理需要高速冷冻离心机进行离心和低温冷冻干燥，工艺复杂，成本高昂，产量低；（4）发酵产物的活菌密度不够高。

发明内容

本发明的目的是提供一种干酪乳杆菌活菌制剂的制备方法，以克服现有的干酪乳杆菌活菌制剂的制备方法存在的上述不足。

实现本发明目的的技术方案如下：

一种干酪乳杆菌活菌制剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）配制培养基；

（2）溶解上罐的培养基，装上pH电极并调整pH值，然后将培养基装入发酵罐中；

（3）对发酵罐中的培养基加温灭菌；

（4）接种干酪乳杆菌种子菌：在发酵罐降温后加入无机盐溶液，然后加入液体石蜡及接入种子菌；

（5）控温发酵；控制pH值和温度，在保温的状态下发酵；

（6）放罐并测定发酵液菌数；

（7）用玉米粉、小麦粉或者大豆粉及其组合物吸附发酵液；

（8）将吸附后的混合物干燥和粉碎，即获得粉状制剂。

 

与现有技术相比，本发明的技术优势：

（1）直接利用普通发酵罐即可进行生产，操作简单，质量稳定，成本低廉，易于产业化生产；