[发明专利]一种载有异烟肼、利福平白蛋白纳米粒制剂及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药制剂纳米技术领域，特别是涉及载有异烟肼、利福平白蛋白纳米粒制剂的新剂型及制备方法。

 背景技术

异烟肼（INH）和利福平（RFP）是国际医学组织WHO推荐的结核病化疗方案中的一线主要药物，其疗效主要取决于靶器官/组织的药物浓度，同时靶组织的病理改变也会影响其生物分布。它们相互无交叉耐药，且由于不同的抗菌机制和协同作用，二者对繁殖期和静止状态的细菌均有较强的抑杀菌作用，联合应用对杀灭细胞内外结核杆菌有协同效果并减少耐药。中国专利局2003年4月9日公开的《一种含有利福平、异烟肼的复合制剂及其制备方法》专利（专利号02136930.5）提出了一种含有利福平、异烟肼的复合制剂，该复合制剂为一种芯片含有利福平，外层为含有异烟肼和吡嗪酰胺的双层包芯片。该发明仅为一般普通的抗结核药之一，治疗效果和药物吸收程度都比较一般。通过对脊柱结核病椎的组织病理、抗痨药物的药物动力学及结核分支杆菌的耐药机制等方面研究显示（被SCI收录，收录号IDS Nonber：373DI）。INH、RFP、PZA等一线抗痨主药在椎体硬化区及其所包裹的结核病灶内浓度极低或检测不到；而在硬化壁外椎骨却可以达到有效杀菌浓度；病椎骨硬化导致病变局部出现抗痨药物灌注及骨髓-血屏障通透性障碍，常规剂型的抗痨药因自身结构和药物动力学特点，很难在脊柱结核病变区长期存留和有效渗透，成为常规化疗难以奏效，疾病迁延不愈和复发的主要原因。查阅国内外文献尚未见到载有抗结核药物的白蛋白纳米粒剂型的报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术在异烟肼、利福平白蛋白纳米粒制剂领域方面存在的空白，创造性的提出一种涉及载有异烟肼、利福平白蛋白纳米粒制剂的新剂型及制备方法。通过该发明治疗结核可以提高常规化疗效果。 

本发明的技术方案如下： 

本发明利用白蛋白、聚乳酸为共同载体，制备出载有两种一线抗结核药物。白蛋白作为一种多功能的药物靶向载体将其包裹于纳米粒表面，可降低微粒对巨噬细胞的亲和力，从而延长循环时间，提高靶向性。同时在白蛋白表面通过化学交联的方法偶联特异性抗体，此类靶向药物依靠单克隆抗体的特异性、对付抗原的亲和性和稳定性，可以使药物分子集中作用于靶细胞上，以提高抗结核化疗的依存性。

本发明的主要原料组成为：原料主药：异烟肼0.08-0.16%（w/v）；利福平0.16-0.17%（w/v）。纳米粒载体：牛血清白蛋白0.08-0.4%（w/v）；聚乳酸0.06-0.08（w/v）。医用有机溶剂：丙酮11-12.2%（v/v）；无水乙醇6.1-11%（v/v）。溶媒：双蒸馏水或生理盐水（过0.22微孔滤膜）75.7-81.6%（v/v）非离子表面活性剂：吐温80  0.1%(v/v)。 

本发明的制备构思如下：    

本发明的白蛋白纳米粒是以白蛋白为基质的纳米级微球，白蛋白材料具有安全无毒、无免疫原性、可生物降解、生物相容性好，尤其对亲水性药物有较高的负载能力。同时以聚乳酸为骨架结构，白蛋白包埋两种一线抗结核药物(异烟肼、利福平)。采用水包油（O/ W）改良乳液-溶剂挥发法将两种极性（异烟肼水溶性，利福平脂溶性）完全相反的药物制备成纳米级制剂，选用沸点低可完全挥发的有机溶剂丙酮和无水乙醇作为有机相，通过在有机相中添加一定体积的非离子表面活性剂吐温80可提高脂溶性药物利福平的载药量。可用生理盐水直接配置制得注射液。也可选用海藻糖和甘露醇作为冻干保护赋型剂，通过冷冻干燥法制得冻干粉针剂，使用时静脉注射。与普通异烟肼、利福平制剂相比纳米载体系统又以其独特的靶向性、缓控释特性和保护药物的作用。 纳米制剂体内血浆药代动力学试验显示具有良好的缓释作用，给药后血浆药物浓度稳定，体现了白蛋白纳米粒缓释剂型的特点。

具体制备方法为： 

1、水相的制备：取处方量的异烟肼和定量牛血清白蛋白（1.0～2.5g）溶于200～240ml溶媒中，使二者充分溶解，构成水相。

2、有机相的制备：取0.15～0.25g聚乳酸溶解于30～34ml丙酮中，待聚乳酸充分溶解后根据加入丙酮的含量，按利福平在丙酮中的溶解度14mg/ml换算加入利福平，1分钟后加入15～34ml无水乙醇。待整个体系充分溶解构成有机相。 

3、纳米粒注射液的制备：将有机相均分四分缓慢在搅拌下滴加入均分四分的水相中，搅拌下挥发完有机溶剂或放置于通风厨内完全挥发有机溶剂，使有机溶剂被完全挥发体系制得半透明纳米液。在有机相中添加非离子表面活性剂吐温80可以提高脂溶性药物利福平的载药量和包封率。