[发明专利]一种有机添加物对金线莲产业化快速繁殖关键技术

权利要求书

1.一种有机添加物对金线莲产业化快速繁殖关键技术：

所述方法具体步骤包括：

1）取材：外植体材料为野生金线莲；在春秋季节采摘，采摘后将其用湿布包好带回实验室备用；

2）培养基的配制： 

    芽诱导培养基：MS +BA 0.5-2.0mg·L^-1+KT 0.5-2mg·L^-1+NAA 0.5-2mg·L^-1 + 蔗糖30g·L^-1+活性炭 1-2g·L^-1+琼脂 6.5g·L^-1；

    丛芽诱导培养基：MS+BA 0.5-3mg·L^-1 +KT 0.5-2mg·L^-1 +NAA 0.5-2mg·L^-1 +蔗糖30g·L^-1 +香蕉汁 50-150 g·L^-1 +蛋白胨 0.5-2.5g·L^-1 +活性炭 1-2g·L^-1 +琼脂6.5g·L^-1； 

芽增殖培养基：1/2MS+BA 0.5-3mg·L^-1 +KT 0.5-2mg·L^-1+NAA 0.5-2mg·L^-1 +香蕉汁50- 150 g·L^-1 +蛋白胨 0.5-2.5g·L^-1 +花宝1号0.5-1.5g·L^-1 +蔗糖30g·L^-1 +活性炭0.5-1.5g·L^-1 +琼脂 6.5g·L^-1；

生根培养基：1/3MS+ IBA 0.5-1mg·L^-1 +NAA 0.5-1mg·L^-1 +马铃薯浆50- 150 g·L^-1 +蔗糖30g·L^-1 +活性炭 0.5-2g·L^-1+琼脂6.5g·L^-1；

所述香蕉汁的制备方法为：将香蕉去皮后粉碎成泥状；

所述马铃薯浆的制备方法为：将马铃薯去皮后粉碎成浆状；

3）材料消毒处理：将采集的野生金线莲用自来水冲洗干净，在距离芽点1-2厘米处剪取茎段，去除多余的叶片，置饱和漂白粉上清液中漂洗15min并用软毛刷轻轻刷洗，冲洗干净后，置于流水中冲滴0.5-1小时，再用双蒸水冲洗2-3次，在超净工作台内用75%的酒精消毒30s，加入0.1wt%HgCl₂处理5-10min；再用无菌水冲4-6遍后置工作台备用；

4）芽诱导培养：将消毒后的材料放在灭过菌的培养皿上，用手术刀切掉与升汞接触的切口部分0.2-0.4cm，然后将材料切成1-2cm 长的茎段分别接种于经高温、高压灭菌的诱导培养基中；培养条件：培养室温度为23±2℃，光照时间12h/d，光照强度500-1000lx, 芽诱导培养30天；得到丛生芽；

5) 增殖培养：将经步骤4）诱导培养所得到的丛生芽切开并剪成长度为1.5-2cm，分别接种在增殖培养基中；接种时将茎段平放在培养基上，经过50-70d增殖培养，将增殖后的丛生芽切割为芽数为5-10个的茎段进行为期50-70d的扩大增殖培养；整个过程的培养室温度为23±2℃，光照时间12h/d，光照强度1500-2000lx；

 6) 诱导生根：将经步骤5）增殖培养出来的幼苗单株切下，带有2-3片叶子，株高1-2cm，转移到生根培养基中；生根培养时间为30天，培养室温度为23±2℃，光照时间12h/d，光照强度1500-2000lx；

7) 瓶苗移栽：经步骤6)诱导生根后，当植株长至10cm时，将试管苗放在自然光下炼苗3-5天后，再打开瓶盖炼苗2-3天，然后从培养瓶中取出，洗去附着在根系的培养基，移入质量比蛭石和腐殖土质量比为1：2的混合基质中，温度控制在15-28℃，湿度保持在70％-85％之间，避免阳光直射，透光率50%-60%。

2.一种有机添加物对金线莲产业化快速繁殖关键技术,其特征在于，所述金线莲为采集自福建省漳州南靖县树海森林的野生金线莲。