[发明专利]多对二硫键定点环化固相合成多肽新工艺

权利要求书

1.一种多对二硫键定点环化固相合成多肽新工艺，所述的新工艺亦称树脂上氧化工艺，其特征在于，所述的新工艺按如下具体步骤如下：

第一步，由于需要多对二硫键，所以适宜的多肽序列含有四个以上半胱氨酸残基，将要配对的半胱氨酸残基进行编号；

第二步，将配对的半胱氨酸残基选择一对用单保护的半胱氨酸，一对用H-Cys(Acm)-OH，一对用H-Cys(MMT)-OH；

第三步，应用多肽固相合成技术将多肽序列固定在固相载体上，其中对应的半胱氨酸残基采用单保护或者用H-Cys(Acm)-OH或者用H-Cys(MMT)-OH；

第四步，序列合成完成后，将树脂载体浸泡在有机溶剂中，然后添加氧化剂，将序列中两个单保护的半胱氨酸残基的-SH氧化，形成二硫键；

第五步，用砂芯滤柱过滤掉溶剂，用纯DCM和DMF清洗树脂；

第六步，将树脂加入含有1％的脱除剂的有机溶剂的容器中，对其中两个半胱氨酸残基保护基的特异性去除；

第七步，用砂芯滤柱过滤溶剂，用ELLMAN试剂检测，用纯DCM和DMF清洗树脂；

第八步，将树脂载体浸泡在有机溶剂中，添加氧化剂，将已去除-HS保护基的两个半胱氨酸残基的-SH氧化，形成二硫键；

第九步，用砂芯滤柱过滤掉溶剂，用纯DCM和DMF清洗树脂；

第十步，用ELLMAN试剂检测，查看反应是否完全，对比本发明和常规工艺的两对二硫键氧化肽合成的优劣。