[发明专利]一种玫瑰黄链霉菌微生物杀菌剂颗粒剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种以玉米芯为基质的，可防治棉花黄萎病等重要农作物病害的玫瑰黄链霉菌微生物杀菌剂颗粒剂。 

背景技术

目前，农作物病害的防治主要以化学农药为主，其长期使用造成对病原菌的选择压力大，易产生抗药性。而且化学农药的高残留、高污染对环境和人、畜的安全造成严重的影响。因此低毒、低残留的生物农药已成为农药研制和生产需求的一大趋势。本发明专利涉及一种玫瑰黄链霉菌微生物杀菌剂颗粒剂，该菌株已委托“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”进行保藏，保藏单位地址：北京市海淀区中关村北一条13号，中国科学院微生物研究所，菌株名称：玫瑰黄链霉菌0116，保藏编号:CGMCC N0.1471，保藏日期：2005年9月30日。玫瑰黄链霉菌（Streptomyces roseoflavus）的诱变菌株0116菌株（以下简称菌株0116），是一株经玫瑰黄链霉菌（Streptomyces roseoflavus）诱变得到的菌株，其活菌和发酵液对多种重要植物病原菌有很强的抑制作用，例如棉花黄萎病病原菌、黄瓜白粉病病原菌、马铃薯疮痂病病原菌、番茄灰霉病病原菌、小麦根腐病病原菌等。温室及大田试验表明，0116菌株及其发酵液对棉花黄萎病有较好的防治效果。近年来，河北农业大学的河北省农作物病虫害生防工程技术研究中心又将该菌株及其发酵液应用到草莓重茬病、设施蔬菜（番茄、西葫芦等）重茬病等的防治上，均表现出良好的防治效果。河北农业大学生防中心于2011年申请了一个该菌株生防制剂的专利，即“一种玫瑰黄链霉菌生物杀菌剂的可湿性粉剂”，专利申请号：201110375945.8，其组份及含量为：玫瑰黄链霉菌菌株繁殖体≥10⁸个；润湿分散剂4%。所述的玫瑰黄链霉菌菌株繁殖体为菌株0116的菌丝和孢子。所述的载体为硅藻土。所述润湿分散剂为木质素磺酸钠。该专利存在的缺陷是硅藻土的吸附力很强，发酵过程中每翻一次盘都比较困难，且干燥完成后，出现大块的板结，较难粉碎，且粉碎过程中，容易对活菌菌体本身造成损害，影响制剂的防治效果。所以有必要在此基础上对制剂加以改进，寻找一种更 简单、易规模化生产的制剂剂型。 

发明内容

1本发明提供一种生产成本低、工艺简单、能够进行规模化生产、施药方式简便，包装和运输成本较小的玫瑰黄链霉菌微生物杀菌剂颗粒剂。 

2本发明是以如下技术方案实现的： 

步骤一，取纯化后的玫瑰黄链霉菌0116，将0116菌株接种于PDA培养基上，28℃培养4-5天后，以1%的比例接种到种子培养基中，放在摇床上，28℃/200r，继续培养3天，得到种子菌发酵液； 

步骤二，将得到的种子菌发酵在无菌条件下，以1%的比例接种到50L的小试发酵罐培养基中，进一步进行小试发酵。得到足量的种子菌发酵液； 

50L发酵罐培养所用的参数： 

培养温度：28℃ 

罐压：0.5Kg/cm²

转速：200r/m 

培养时间：3天 

步骤三，将得到的足量的种子菌发酵在无菌条件下，以1%的比例接种到500L的液体发酵罐培养基中，进一步进行中试，扩大发酵。得到玫瑰黄链霉菌0116液体发酵液； 

500L发酵罐培养所用的参数： 

培养温度：28℃ 

罐压：0.5Kg/cm²

转速：200r/m 

培养时间：6天 

所用的种子培养基为：3％花生饼粉，4.5%淀粉，1.5％葡萄糖，0.75％氯化钠，0.3％醇母膏，0.9％硫酸铵，0.03％磷酸二氢钾，0.375％碳酸钙，0.105%硫酸亚铁，0.105％硫酸锌，3％蔗糖，0.3％果糖，pH自然。 

发酵罐培养基为四号发酵培养基：2％花生饼粉，3%淀粉，1％葡萄糖，0.5％氯化钠，0.2％醇母膏，0.6％硫酸铵，0.02％磷酸二氢钾，0.25％碳酸钙，0.07%硫酸亚铁，0.07％硫酸锌，2％蔗糖，0.2％果糖，pH自然。 

步骤四，将玉米芯用装有5号筛的粉碎机粉碎，然后收集粗颗粒再用10号筛继续粉碎，收集这些颗粒用以下步接种发酵。最后将未能过10号筛的颗粒弃掉；