[发明专利]一种杜鹃花属菌根试管内直接诱导和菌根化种苗快繁方法

说明书

技术领域　

本发明涉及一种植物繁殖技术，即一种杜鹃花属菌根试管内直接诱导和菌根化种苗快繁方法。 

背景技术

在现有技术中，杜鹃花属植物根系没有根毛，吸收能力比具有根毛的根系小得多，但自然条件下几乎所有的杜鹃细根都有EM(Eriocdimyochrriaz，EM)内生菌根真菌的寄生，从而克服了杜鹃由于没有根毛而造成的对水分及营养的吸收困难，改善植株营养状况，调节宿主的代谢活性，增强植株的抗逆性，提高杜鹃的产量，加快移栽苗成活速度，节约农业生产成本，增加经济产量和效益。因而将杜鹃组培技术和菌根化技术相结合，生产生长势旺、抗逆能力强的杜鹃苗木是一项很有经济价值的研究项目。在国外，新西兰已经将接种菌根真菌作为促进杜鹃生长、提高肥料利用率、提高产量的一项有效措施。而在国内EM真菌的分离和研究几乎还是一片空白。要生产菌根化苗木的关键是选用适宜当地生态条件的优良菌种用于接种，培育出优质的菌根化杜鹃种苗，在生产和应用中将产生巨大的经济效益。

目前，杜鹃属植物菌根的研究大多集中在菌根菌的分离和鉴定方面，很少达到与植物的共建并利用于栽培生产。杜鹃花属植物菌根的建立大多采用种苗繁殖后再行菌根真菌侵染等多步骤方式完成，这些方法存在步骤和操作复杂、侵染率等问题。本发明开展的杜鹃花试管内菌根直接诱导和含菌根苗高效快繁的报道国内外迄今未见。

发明内容

本发明的目的是针对上述不足而提供一种利用植物组织培养技术，以野生杜鹃花根芽的嫩茎在试管内开展了直接诱导菌根的研究，旨在直接建立杜鹃花菌根苗快繁体系，为杜鹃花生长发育和提高品质提供基础保障的杜鹃花属菌根试管内直接诱导和菌根化种苗快繁方法。

本发明的技术解决方案是：一种杜鹃花属菌根试管内直接诱导和菌根化种苗快繁方法，其步骤如下：

（1）外植体材料的处理： 8月中旬采杜鹃花靠近根部新萌发的嫩芽，消毒处理后切割成1～2叶1段作为外植体备用；

（2）杜鹃花菌根诱导的培养基为：基本培养基+KT0.50 mg·L^-1+IAA 0.02 mg·L^-1+GA₃0.70 mg·L^-1；添加蔗糖15.00 g·L^-1，琼脂粉7.00 g·L^-1，调节pH 值为5.6；在温度24±2℃，光照强度1 400 lx条件下培养，光照周期14 h·d^-1；得外植体；所述的基本培养基成分和含量：63 mg·L^-1(NH₄)₂SO₄，180 mg·L^-1KNO₃，220 mg·L^-1CaCl₂·2H₂O，178 mg·L^-1MgSO₄·7H₂O，302 mg·L^-1KH₂PO₄；9.2 mg·L^-1FeSO₄·7H₂O，12.5 mg·L^-1Na₂·EDTA·2H₂O；10.8 mg·L^-1MnSO₄·4H₂O，6.2 mg·L^-1ZnSO₄·7H₂O，4.1 mg·L^-1H₃BO₃，0.15 mg·L^-1KI，0.05 mg·L^-1Na₂MO₄·2H₂O；

（3）将外植体在基本培养基+玉米素ZT2.20 mg·L^-1上培养出细小嫩腋芽，待嫩腋芽长至1.00～2.00 cm时，再将腋芽从叶腋处切下转接到基本培养基+KT0.50 mg·L^-1+IAA 0.02 mg·L^-1+GA₃0.70 mg·L^-1中；培养60 d统计并计算出菌根化苗的诱导率；