[发明专利]一种杜鹃花属菌根试管内直接诱导和菌根化种苗快繁方法

权利要求书

1.一种杜鹃花属菌根试管内直接诱导和菌根化种苗快繁方法，其步骤如下：

（1）外植体材料的处理： 8月中旬采杜鹃花靠近根部新萌发的嫩芽，消毒处理后切割成1～2叶1段作为外植体备用；

（2）杜鹃花菌根诱导的培养基为：基本培养基+KT0.50 mg·L^-1+IAA 0.02 mg·L^-1+GA₃0.70 mg·L^-1；添加蔗糖15.00 g·L^-1，琼脂粉7.00 g·L^-1，调节pH 值为5.6；在温度24±2℃，光照强度1 400 lx条件下培养，光照周期14 h·d^-1；得外植体；所述的基本培养基成分和含量：63 mg·L^-1(NH₄)₂SO₄，180 mg·L^-1KNO₃，220 mg·L^-1CaCl₂·2H₂O，178 mg·L^-1MgSO₄·7H₂O，302 mg·L^-1KH₂PO₄；9.2 mg·L^-1FeSO₄·7H₂O，12.5 mg·L^-1Na₂·EDTA·2H₂O；10.8 mg·L^-1MnSO₄·4H₂O，6.2 mg·L^-1ZnSO₄·7H₂O，4.1 mg·L^-1H₃BO₃，0.15 mg·L^-1KI，0.05 mg·L^-1Na₂MO₄·2H₂O；

（3）将外植体在基本培养基+玉米素ZT2.20 mg·L^-1上培养出细小嫩腋芽，待嫩腋芽长至1.00～2.00 cm时，再将腋芽从叶腋处切下转接到基本培养基+KT0.50 mg·L^-1+IAA 0.02 mg·L^-1+GA₃0.70 mg·L^-1中；培养60 d统计并计算出菌根化苗的诱导率；

（4）菌根化植株的快繁：待含有菌根的苗生长至2.50 cm以上时，将含有菌根的试管苗于根上部留1～2叶切下，并将切下的小枝条再切割成一叶一段转接到优化后的菌根诱导培养基：基本培养基+ KT0.50 mg·L^-1+IAA 0.02 mg·L^-1+GA₃0.70 mg·L^-1中进行同时腋芽萌发、生长及菌根再生培养；35 d为1个继代增殖周期。