[发明专利]表达 PCV2密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒

权利要求书

1.表达2型猪圆环病毒（PCV2）密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒，其特征在于，是由以下方法构建而成：

1） 密码子优化PCV2 ORF1和ORF2基因

人工合成经密码子优化的PCV2 ORF1和ORF2基因，该基因定名为YHsfORF1-2，其序列为SEQ.ID.NO.1，将YHsfORF1-2连入pMD-18T载体，获得pMD-18T- YHsfORF1-2；

2） 重组质粒pFBHYHsfORF1-2的构建与鉴定

将pMD-18T-YHsfORF1-2中YHsfORF1-2基因用SpeI和XholI双酶切，克隆到用相同双酶切线性化的pFastBacHTA载体上，得到重组质粒pFBHYHsfORF1-2，转化含helper质粒与Bacmid DNA的大肠埃希菌DH10Bac，制备pFBHYHsfORF1-2 Bacmid DNA，并用PCR法进行鉴定；

3） 表达2型猪圆环病毒密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒的获得

将pFBHYHsfORF1-2 Bacmid DNA转染Sf9细胞，获得重组病毒vFBHYHsfORF1-2。

2.用权利要求1所述表达2型猪圆环病毒密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒制备的疫苗。