[发明专利]用于治疗呈现存活蛋白抗原的肿瘤的组合物和方法

说明书

本申请是申请日为2006年9月27日、发明名称为“用于治疗呈现存活蛋白抗原的肿瘤的组合物和方法”的中国专利申请200680034598.X(国际申请号PCT/EP2006/009359)的分案申请。

技术领域

本发明涉及用于肿瘤治疗的疫苗接种方案。具体地，本发明涉及疫苗组合物，其在人中刺激对人存活蛋白的免疫应答，因此攻击过量表达存活蛋白的肿瘤患病细胞。具体地，本发明涉及疫苗组合物，其包含来自非哺乳动物存活蛋白以及来自修饰的哺乳动物的特别是人的存活蛋白的肽。

背景技术

免疫系统通过监控细胞的蛋白质组成来部分地实现了其监视功能。在称作T细胞抗原呈递的过程中，细胞内的蛋白质被加工为肽。加工的肽的亚组（抗原）被运出至细胞表面，与一类受体的成员特异性结合，所述一类受体被称作主要组织相容性复合体（MHC）受体。这些MHC肽复合体通过与已知为T细胞受体（TCR）的T细胞表面蛋白质相互作用，由特化的免疫细胞T细胞取样。每个给定的T细胞在其表面携带独特的TCR。当T细胞的TCR与MHC-肽复合体产生性相互作用时，免疫应答被活化，这导致呈递特定MHC-肽复合体的细胞的消除。通常，如果呈递的抗原来自宿主（所谓的“自身”抗原），相互作用为非生产性的。一般地，免疫应答由与来自外源蛋白质的抗原的相互作用来活化，例如与来自感染病毒的组成性蛋白质的抗原相互作用来活化。

通过活化免疫治疗肿瘤的目的是诱导免疫系统识别和消除肿瘤细胞。正如在任何其他细胞中，肿瘤细胞上的肽抗原来自表达的蛋白质的所有组成成分（repertoire）。正如病毒抗原在受感染的细胞中一样，来自肿瘤中差别表达的蛋白质的肿瘤富含的抗原原则上是免疫监视的靶标。因此，为了消除肿瘤的目的，所述抗原可以被用来控制免疫系统的分支，其已经被进化为对抗细胞内感染。

一种此类肿瘤富含的蛋白质是存活蛋白。肿瘤细胞通常过量表达存活蛋白蛋白质，这被认为阻断了细胞凋亡并且因此干扰阻止肿瘤细胞异常生长的机制。另一方面，正常细胞表达非常少的存活蛋白。（见例如，Ambrosini等人，（1997）Nat.Med.,3:917-921）。因此，存活蛋白是理想的肿瘤特异性或肿瘤富含的抗原。可以有用地将存活蛋白蛋白质的抗原形式递送到抗原呈递细胞，从而可以刺激对存活蛋白的免疫应答。但是，与病毒感染的细胞相反，存活蛋白与许多其他在肿瘤中差别表达的蛋白质类似，是宿主蛋白质，并且不活化免疫系统。因此，在本领域中仍需要开发引发针对肿瘤细胞，特别是特征为过量表达存活蛋白的那些肿瘤细胞的有效免疫应答的有效组合物和方法。

发明概述

本发明提供了引发针对肿瘤细胞的有效免疫应答的有效组合物和方法。具体地，本发明提供了使用肿瘤富含的蛋白质的抗原形式作为T细胞抗原的接种方案。特别地，本发明提供了肿瘤富含的蛋白质存活蛋白的抗原形式。

因此，本发明一方面涉及包含核酸的疫苗，所述疫苗编码至少一种来自非哺乳动物存活蛋白的肽。备选地，本发明涉及包括至少一种来自非哺乳动物存活蛋白的肽的疫苗。如本文所用的，“非哺乳动物存活蛋白”包括至少任何具有BIR结构域（或IAP结构域）的存活蛋白蛋白质，所述结构域与人存活蛋白BIR结构域具有多于50%的氨基酸同一性但是少于90%的氨基酸同一性，例如与人存活蛋白BIR结构域具有至少55%、60%、65%、70%、75%、80%或85%的同一性。“非哺乳动物存活蛋白”还包括在本领域普通技术人员已知的非哺乳动物物种中鉴定的任何存活蛋白蛋白质。如本文所用的，“肽”包括具有任何数量氨基酸的肽，包括全长存活蛋白蛋白质。特别地，肽可以包含至少8、9、10、15、20、25、30或更多个氨基酸。

在一个优选的实施方案中，本发明的疫苗包括编码来自非哺乳动物存活蛋白的肽的核酸。核酸可以包括哺乳动物启动子。在一个实施方案中，核酸是裸DNA。在另一个实施方案中，核酸是用增强哺乳动物细胞转染的试剂配制的。本发明的疫苗还可以包括佐剂。

在一个实施方案中，核酸是病毒颗粒例如腺病毒颗粒的一部分。适合于本发明的腺病毒颗粒包括来自能够复制的腺病毒的那些，或来自条件复制腺病毒（“CRAD”）（仅在某些细胞或仅在某些条件中复制）的那些，或来自无能力复制的腺病毒的那些。其他适当的病毒颗粒包括但不限于来自慢病毒或其他RNA病毒、腺伴随病毒、轮状病毒或痘苗病毒等的病毒颗粒。